Question

7．轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等技術(shù)獲得的胚胎，都必須移植給受體才能獲得后代．因此胚胎移植又是胚胎工程其他技術(shù)的最后一道“工序”．
（1）為目的基因在受體細胞中高效表達，需要把來自 cDNA 文庫的目的基因片段正確插入基因表達載體的啟動子和終止子之間．要將目的基因?qū)�入動物受精�?nbsp;中，常用顯微注射法．
（2）進行核移植時，從供體高產(chǎn)牛身體的某一部位上取體細胞，并用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理分散成單個細胞．培養(yǎng)時，充入 CO₂的主要作用是 維持培養(yǎng)液的pH．
（3）體外受精時，要對精子進行體外進行的獲能處理．受精的卵母細胞要培養(yǎng)到MII期．
（4）為讓母畜超數(shù)排卵，可注射促性腺激素．胚胎移植的受體畜要進行同期發(fā)情處理．若取囊胚進行胚胎分割，必須要將內(nèi)細胞團平均分割．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定．
2、動物細胞培養(yǎng)過程中，細胞會表現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，因此需定期用胰蛋白酶處理進行分裝培養(yǎng)；在培養(yǎng)過程中要求一定的培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．（3）適宜的溫度和PH．（4）氣體環(huán)境．

解答 解：（1）啟動子啟動基因的轉(zhuǎn)錄，終止子終止基因的轉(zhuǎn)錄，為目的基因在受體細胞中高效表達，需要把來自 cDNA 文庫的目的基因片段正確插入基因表達載體的啟動子和終止子之間．要將目的基因?qū)�入動物受精卵中，常用顯微注射法．
（2）進行核移植時，從供體高產(chǎn)牛身體的某一部位上取體細胞，并用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理分散成單個細胞．培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中充入 CO₂，用以維持培養(yǎng)液的pH．
（3）體外受精時，要對精子進行體外進行的獲能處理．受精的卵母細胞要培養(yǎng)到MII期．
（4）為讓母畜超數(shù)排卵，可注射促性腺激素．胚胎移植的受體畜要進行同期發(fā)情處理．若取囊胚進行胚胎分割，必須要將內(nèi)細胞團平均分割．
故答案為：
（1）啟動子     終止子     顯微注射
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）     維持培養(yǎng)液的 pH
（3）獲能      MII
（4）促性腺激素   同期發(fā)情      內(nèi)細胞團

點評 本題考查了基因工程和胚胎工程的有關(guān)知識，要求考生識記基因的原理和操作步驟，識記動物細胞培養(yǎng)的過程以及培養(yǎng)條件，掌握胚胎工程中體外受精技術(shù)以及胚胎移植技術(shù)中相關(guān)知識點．