Question

【題目】甘露聚糖酶是分解纖維素的重要酶。該酶大量存在于土壤纖維素分解菌中。現(xiàn)采用基因工程方法將甘露聚糖酶基因?qū)�入動物腸道酵母菌中，以幫助動物消化纖維素。請回答：

（1）從土壤纖維素分解菌中獲得甘露聚糖酶，通過分析該酶的__________序列，優(yōu)先選擇酵母菌偏愛的密碼子，找到相對應(yīng)的__________序列，通過__________（填方法名稱）法合成甘露聚糖酶基因。

（2）甘露聚糖酶基因與質(zhì)粒進(jìn)行連接構(gòu)建表達(dá)載體，表達(dá)載體中甘露聚糖酶基因應(yīng)位于_________之間才能表達(dá)，表達(dá)載體還需加入一些調(diào)控元件，將該工程的表達(dá)載體構(gòu)建為分泌型表達(dá)載體而非胞內(nèi)型表達(dá)載體，目的是__________。

（3）通過電擊方法將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到處于_______的酵母細(xì)胞，經(jīng)檢測轉(zhuǎn)化成功的酵母細(xì)胞不存在環(huán)狀DNA，可初步推測導(dǎo)入的表達(dá)載體已整合到酵母細(xì)胞的__________上。

（4）獲得的甘露聚糖酶需要與天然的甘露聚糖酶進(jìn)行__________比較。

Answer 1

【答案】氨基酸 脫氧核苷酸 人工化學(xué)合成法 啟動子和終止子 使轉(zhuǎn)基因的酵母細(xì)胞合成的甘露聚糖酶能夠分泌到動物腸道中 感受態(tài) 染色體 功能活性

【解析】

基因工程的基本操作程序：

1、目的基因的獲取方法：①從基因文庫中獲取；②人工合成（反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法）；③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：

3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞常用的轉(zhuǎn)化方法：常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射技術(shù)、Ca2+處理法。

4、目的基因的檢測和表達(dá)：

（1）甘露聚糖酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，所以需要分析酶的氨基酸序列，找到可相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，通過人工化學(xué)合成法合成目基因。

（2）目的基因應(yīng)位于啟動子和終止子之間才能表達(dá)；該基因工程改造的是動物腸道的酵母菌，讓轉(zhuǎn)基因的酵母菌能夠分泌甘露聚糖酶幫助動物消化纖維素，所以為了使轉(zhuǎn)基因的酵母細(xì)胞合成的甘露聚糖酶能夠分泌到動物腸道，必須構(gòu)建為分泌型表達(dá)載體。

（3）將目的基因?qū)�入微生物，微生物必須處于易于接受周�?/span>DNA的狀態(tài)（感受態(tài)），如果化成功的酵母細(xì)胞不存在環(huán)狀DNA，可初步推測導(dǎo)入的表達(dá)載體已整合到酵母細(xì)胞的染色體上。

（4）有的基因工程產(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的功能活性是否與天然產(chǎn)品相同。