Question

15．圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用纖維素酶和果膠酶處理，除去細(xì)胞壁；A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的物理方法是離心、振動(dòng)、電刺激．融合完成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁．
（2）若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用植株組織培養(yǎng)技術(shù)把D培養(yǎng)成植株．
（3）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自幼齡動(dòng)物的器官和組織，然后用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使其分散開來，A、B到C的過程中，常用的不同于植物細(xì)胞的手段是用滅火的病毒做誘導(dǎo)劑，所形成的D 稱為雜種細(xì)胞．
（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了抗原，注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）生成了抗體和記憶細(xì)胞．圖中B為骨髓瘤細(xì)胞．
（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有3種，用來培養(yǎng)的D的細(xì)胞應(yīng)該是雜交瘤細(xì)胞．從中選擇出它的方法是用特定的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是小鼠腹腔內(nèi)和培養(yǎng)基體內(nèi)培養(yǎng)．

Answer 1

分析 1、若A、B為植物細(xì)胞，則圖示為植物體細(xì)胞雜交過程，在細(xì)胞融合之前應(yīng)用纖維素酶、果膠酶去除植物細(xì)胞壁，C為正在融合的細(xì)胞，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)常用化學(xué)法（聚乙二醇），形成雜種細(xì)胞后要利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培養(yǎng)成植株；
2、若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，則一般取自動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，然后使用胰蛋白酶處理使之分散成單個(gè)細(xì)胞，在進(jìn)行培養(yǎng)，在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，誘導(dǎo)方法有化學(xué)法、物理法和生物法（滅活病毒），植物體細(xì)胞雜交則只能使用化學(xué)法和物理法．
3、單克隆抗體的制備過程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）植物體細(xì)胞雜交時(shí)，在細(xì)胞融合之前先要去除細(xì)胞壁，常用酶解法，即用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞；誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法包括：物理法（電刺激、振動(dòng)、離心）和化學(xué)法（PEG）；植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是產(chǎn)生新的細(xì)胞壁．
（2）將雜種細(xì)胞D培養(yǎng)成雜種植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（3）取幼齡動(dòng)物組織或胚胎，因?yàn)槠渖�命力旺盛，�?xì)胞分裂能力強(qiáng)；用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理使其分散開形成單個(gè)細(xì)胞；動(dòng)物細(xì)胞融合過程，不同于植物細(xì)胞融合的手段是滅活的病毒．所形成的D稱為雜種細(xì)胞．
（4）制備單克隆抗體的細(xì)胞來源是效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，故若A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了抗原，體產(chǎn)生了相應(yīng)的漿細(xì)胞，生成了抗體和記憶細(xì)胞，圖中B是骨髓瘤細(xì)胞，D是雜交瘤細(xì)胞．
（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有有3種，B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，需要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，接著在培養(yǎng)液中培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶  細(xì)胞壁  電刺激、振動(dòng)、離心   產(chǎn)生細(xì)胞壁
（2）植物組織培養(yǎng)
（3）動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織  胰蛋白酶  滅火病毒誘導(dǎo)  雜種細(xì)胞
（4）抗原  漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）    抗體和記憶細(xì)胞  骨髓瘤細(xì)胞
（5）3  雜交瘤細(xì)胞  用特定的選擇培養(yǎng)基  培養(yǎng)基中培養(yǎng)  小鼠腹腔內(nèi)

點(diǎn)評(píng) 本題考查植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，難度較小，但必需熟記相關(guān)過程，解題時(shí)注意植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的對(duì)比．