Question

【題目】凝血因子Ⅸ是在肝臟細(xì)胞中合成的一種糖蛋白，B型血友病患者缺乏凝血因子Ⅸ。上海奉新動物實驗場成功研制出轉(zhuǎn)基因羊，進(jìn)入泌乳期后，乳汁中有活性的人凝血因子Ⅸ，用于治療血友病。回答下列問題：

（1）為獲取目的基因，需要在肝臟細(xì)胞中提取 ，通過反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA，再構(gòu)建cDNA文庫。

（2）將凝血因子Ⅸ基因與乳腺蛋白基因的 等調(diào)控組件重組在一起，構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后通過 技術(shù)，導(dǎo)入羊的受精卵中。

（3）受精卵通過早期胚胎培養(yǎng)，發(fā)育到 階段，通過 到受體子宮孕育。為了選育出能泌乳的雌羊，一般在胚胎的 部位取樣，做DNA分析性別鑒定。

（4）凝血因子Ⅸ是一種糖蛋白，因此用上述方法生產(chǎn)，相對傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌生產(chǎn)，優(yōu)勢在于 。

Answer 1

【答案】

（1）mRNA

（2）啟動子 顯微注射

（3）桑椹胚或囊胚 胚胎移植 滋養(yǎng)層

（4）羊細(xì)胞有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，具備蛋白質(zhì)加工的能力

【解析】（1）提取mRNA可以反轉(zhuǎn)錄得到cDNA。

（2）由于凝血因子Ⅸ基因需要在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，所以要與乳腺蛋白基因的啟動子組合。重組DNA導(dǎo)入動物細(xì)胞的方法是顯微注射技術(shù)。

（3）牛和羊胚胎移植的適宜階段是桑椹胚或囊胚。為了做DNA性別分析，一般去滋養(yǎng)層的細(xì)胞。

（4）羊是真核生物，細(xì)胞具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，具備蛋白質(zhì)加工的能力，而凝血因子Ⅸ是一種糖蛋白，需要加工。