Question

14．基因工程是在現(xiàn)代生物學、化學和工程學基礎上建立和發(fā)展起來的，并有賴于微生物學理論和技術的發(fā)展，現(xiàn)在基因工程在動植物育種上有廣泛而重要的應用．基因工程基本操作流程如圖所示，請據(jù)圖分析回答問題．

（1）圖中A是運載體，最常用的是質粒．
（2）在基因工程中，核心步驟是基因表達載體的構建．其組成除了目的基因外，還必須有啟動子、終止子以及標記基因等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位．
（3）轉基因綿羊的培育過程，其中③過程常用的方法是顯微注射，使用的綿羊受體細胞為受精卵．
（4）轉基因耐鹽棉的培育過程，其中③過程常用的方法有農桿菌轉化法和基因槍（花粉管通道）法．為了確定轉基因耐鹽水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的耐鹽基因（目的基因）作探針進行檢測．又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是基因工程的基本操作流程，其中A為運載體；①目的基因的獲取，②基因表達載體的構建，③將目的基因導人受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）分析圖解，基因工程中需要將目的基因和運載體構建成重組質粒，因此圖中A是運載體，常用的運載體是質粒．
（2）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建．基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、標記基因以及終止子等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位．
（3）培育轉基因動物時，應該以受精卵（因為受精卵的全能性最高）作為受體細胞；將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法．
（4）轉基因耐鹽棉的培育過程，目的基因導入植物細胞過程常用的方法有：農桿菌轉化法和基因槍法（或花粉管通道法）法．為了確定轉基因耐鹽水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的耐鹽基因（目的基因）作探針進行分子水平的檢測；又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性．
故答案為：
（1）運載體 質粒 
（2）基因表達載體的構建  標記基因  RNA聚合酶  
（3）顯微注射  受精卵  
（4）基因槍（花粉管通道）  耐鹽基因（目的基因）　一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）

點評 本題結合基因工程的基本操作流程圖，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應用；明確目的基因可以在受體細胞中得到表達的生理基礎．