Question

【題目】為提高我國稻米的含鐵量，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將菜豆的鐵結(jié)合蛋白基因?qū)�入了一個高產(chǎn)粳稻品種中，獲得了高含鐵量轉(zhuǎn)基因水稻株系．如圖為培育過程．請分析并回答問題：
（1）獲取重組載體用到的“手術(shù)刀”是 ， ②過程通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組載體導(dǎo)入細(xì)胞．
（2）重組載體中標(biāo)記基因的作用是 ． 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄，需用作探針．
（3）圖中①③④過程須在條件下進行，培養(yǎng)基中除加入營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加植物激素，作用是 ．
（4）過程④除了用秋水仙素或低溫誘導(dǎo)來處理，還可以采用技術(shù)，該技術(shù)常用的誘導(dǎo)劑是 ．
（5）上述培育轉(zhuǎn)基因水稻的操作過程中最為核心的步驟是 ．

Answer 1

【答案】
（1））限制酶；愈傷組織
（2）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因
（3）無菌；促進細(xì)胞分裂、生長、分化
（4）植物體細(xì)胞雜交；聚乙二醇（PEG）
（5）基因表達載體的構(gòu)建
【解析】解：（1）獲取重組載體用到的“手術(shù)刀”是限制性核酸內(nèi)切酶．由圖可知，②過程通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組載體導(dǎo)入愈傷組織細(xì)胞．（2）重組載體中的標(biāo)記基因的作用是檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄，需用同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因作探針，然后再采用分子雜交法．（3）圖中基因工程的操作以及植物的組織培養(yǎng)過程須在無菌條件下進行，培養(yǎng)基中除加入營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加植物激素，作用是促進細(xì)胞分裂、生長、分化．（4）由于花藥培養(yǎng)出的細(xì)胞染色體是體細(xì)胞的一般，因此過程④用秋水仙素或低溫誘導(dǎo)來處理是為了讓細(xì)胞的染色體數(shù)目加倍，該過程還可以采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)常用的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇．（5）上述培育轉(zhuǎn)基因水稻采用了基因工程技術(shù)，其核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建． 所以答案是：（1）限制酶；愈傷組織（2）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；同位素標(biāo)記的鐵結(jié)合蛋白基因（3）無菌；促進細(xì)胞分裂、生長、分化（4）植物體細(xì)胞雜交；聚乙二醇（PEG）（5）基因表達載體的構(gòu)建
【考點精析】根據(jù)題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術(shù)和植物培養(yǎng)的條件及過程的相關(guān)知識可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)；植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株．