Question

不屬于目的基因與運(yùn)載體結(jié)合過(guò)程的是（　�。�

• A、用一定的限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒露出黏性末端
• B、用同種限制性內(nèi)切酶切斷目的基因露出黏性末端
• C、將切下的目的基因的片段插入到質(zhì)粒切口處
• D、將重組DNA引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：AB、構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，以產(chǎn)生相同的黏性末端，A正確，B正確；
C、構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，還需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合形成重組DNA分子，C正確；
D、將重組DNA引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增不屬于基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，屬于將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程，D錯(cuò)誤．
故選：D．

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．