Question

【題目】日前，微博傳言單位面積上手機屏幕上的細菌比馬桶按鈕上的多。下圖是某校甲、乙兩個生物興趣小組展示的實驗調查結果�；卮鹣铝邢嚓P問題：

（1）在制備該培養(yǎng)基的過程中，除了添加微生物所需的基本營養(yǎng)物質外，培養(yǎng)基還需滿足微生物生長對___________________等的要求。由圖中4組培養(yǎng)結果可知．該實驗接種微生物的方法為______________________。

（2）通過觀察菌落的_________________________________（答兩點）等特征，可對手機屏幕和馬桶按鈕上存在的微生物進行初步鑒定。但若要進一步確定是否存在大腸桿菌，可以加入______________________指示劑進行鑒定，若培養(yǎng)基中出現___________菌落，則說明存在大腸桿菌。

（3）按圖示面積取樣，小組成員定某手機屏幕的細菌數量，將10mL菌懸液進行梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數為102的樣品液接種到四個培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，統計菌落數分別為38、40、42、29，則該手機屏幕的細菌數為___________個/平方厘米，為了使該實驗統計的數據更準確，應另外設置對照實驗．請問如何設置？______________________________

Answer 1

【答案】pH、特殊營養(yǎng)物質、氧氣 稀釋涂布平板法 形狀、大小、隆起程度、顏色 伊紅一美藍 黑色 l.6×104 取空白培養(yǎng)基涂布01mL無菌水，在相同環(huán)境下培養(yǎng)

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。

2、統計菌落數目的方法

（1）顯微鏡直接計數法

①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數； ③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計數法（活菌計數法）

①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

②操作

a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。

b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。

③計算公式：每克樣品中的菌株數=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數。

（1）微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。由圖中4組培養(yǎng)結果可知．該實驗接種微生物的方法為稀釋涂布平板法。

（2）一般菌落具有特定的形狀、大小、顏色等特征，可對手機屏幕和馬桶按鈕上存在的微生物進行初步鑒定。若要進一步確定其中大腸桿菌的菌落數，還需要配制伊紅和美藍培養(yǎng)基加以鑒別。

（3）該手機屏幕的細菌密度為=（38+40+42）÷3÷0.1×10×102÷25= l.6×104個/平方厘米，為了使該實驗統計的數據更準確，應另外設置對照實驗，取空白培養(yǎng)基涂布0.1mL無菌水，在相同環(huán)境下培養(yǎng)。