Question

【題目】某研究性學(xué)習(xí)小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發(fā)酵中產(chǎn)生乳酸，還可以降解亞硝酸鹽，該小組利用泡菜液進(jìn)行了相關(guān)的研究。請回答下列問題：

（1）乳酸菌和酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是乳酸菌____________________________。

（2）測定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用_________法。食物中的亞硝酸鹽絕大部分隨人體尿液排出，其余的在特定條件下可以轉(zhuǎn)變?yōu)橹掳┪?/span>______________。

（3）小組成員用改良的MRS固體培養(yǎng)基分離乳酸菌，該培養(yǎng)基成分如下：

蛋白胨	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖	CaCO3	瓊脂	蒸餾水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000ml

①該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養(yǎng)基屬于______（填選擇或鑒別）培養(yǎng)基。

②小組成員在分離純化乳酸菌時，用______將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后，取0．1ml加入到50℃左右的培養(yǎng)基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層透明的固體培養(yǎng)基。 加蓋一層透明的固體培養(yǎng)基的目的是_____________________________________________。

③在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后，挑取溶鈣圈較大的菌落，用平板劃線法進(jìn)行進(jìn)一步純化。若圖甲是接種培養(yǎng)后的菌落分布圖，對應(yīng)的平板劃線操作示意圖為___________。

④乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的___________。

Answer 1

【答案】無以核膜為界限的細(xì)胞核 比色 亞硝胺 鑒別 無菌水 隔絕空氣（氧氣），確保無氧環(huán)境 丙 甘油

【解析】

（1）運(yùn)用平板劃線法接種微生物時，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落；

（2）培養(yǎng)基的分類：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

（1）乳酸菌屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是原核細(xì)胞無以核膜為界限細(xì)胞核；
（2）測定泡菜中亞硝酸鹽的含量時，要將顯色后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行比色，該方法叫比色法；食物中的亞硝酸鹽絕大部分隨人體尿液排出，其余的在特定條件下可以轉(zhuǎn)亞硝胺，亞硝胺是致癌物；

（3）①鑒別培養(yǎng)基是依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)的，故題干中的培養(yǎng)基類型屬于鑒別培養(yǎng)基；

②為避免雜菌混入，進(jìn)行梯度稀釋應(yīng)用無菌水操作；因乳酸菌為厭氧生物，故加蓋一層固體培養(yǎng)基的目的是隔絕空氣（氧氣），確保無氧環(huán)境；

③使用平板劃線法時，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線，畫3-5道直線，且最后一個區(qū)域不能與第一區(qū)域相連，如圖丙所示；

④長期保存菌種應(yīng)該用甘油管藏法，因此乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的甘油。