Question

科研人員將綠色熒光蛋白（GTP）基因?qū)�入金魚(yú)的受精卵中進(jìn)行有關(guān)研究，請(qǐng)回答：
（1）上述過(guò)程中的GTP基因稱為

 

，該基因可由mRNA

 

形成．
（2）已知GTP基因的DNA兩端分別有EcoR I、Sma I切割位點(diǎn)，切割下來(lái)的GTP基因含有

 

 末端和

 

末端．
（3）質(zhì)粒用EcoR I、Sma I切割之后，需用

 

將GTP基因與其連接形成重組質(zhì)粒．
（4）GTP基因重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵通常用

 

法，受精卵經(jīng)過(guò)卵裂、桑椹胚、

 

、原腸胚等階段發(fā)育為胚胎．紫外光下觀察，可以看到轉(zhuǎn)基因魚(yú)發(fā)光部位存在差異，其原因是

 

．
（5）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用GTP代替抗氨芐青霉素基因作為

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析：1、目的基因：主要指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子．獲得目的基因的方法：①?gòu)幕�因文�?kù)中獲取  ②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增  ③人工合成（化學(xué)合成）．
2、限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的．其能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性．結(jié)果是經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．
DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒重組．
2、將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法：顯微注射技術(shù)．（最有效一種方法）．具體操作程序：目的基因表達(dá)載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性動(dòng)物的子宮或輸卵管內(nèi)發(fā)育→新性狀動(dòng)物．

解答： 解：（1）將綠色熒光蛋白（GTP）基因?qū)�入金魚(yú)的受精卵中進(jìn)行有關(guān)研究，說(shuō)明GTP基因是目的基因．獲取目的基因的方法有很多，可以通過(guò)mNRA反轉(zhuǎn)錄法人工合成．
（2）據(jù)題可知EcoRI、SmaI上限制性酶，它們分別可將目的基因切割，并產(chǎn)生黏性末端和平口末端．
（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒中被限制酶切割的末端連接．
（4）受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，可用顯微注射法將基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)化入受體細(xì)胞中．早期胚胎發(fā)育經(jīng)過(guò)卵裂期、桑葚胚期、囊胚期、原腸胚期．紫外光下觀察，可以看到轉(zhuǎn)基因魚(yú)可以發(fā)光，說(shuō)明了目的基因在受體中已經(jīng)能表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)了，但是發(fā)光部位存在差異，說(shuō)明了目的基因的表達(dá)具有選擇性．
故答案為：
（1）目的基因    反轉(zhuǎn)錄 
（2）黏性   平
（3）DNA連接酶
（4）顯微注射   囊胚   基因選擇性表達(dá)
（5）標(biāo)記基因

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程的相關(guān)內(nèi)容，意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論．