Question

【題目】炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病，而噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。對炭疽病疑似患者，可通過圖1所示鑒定炭疸桿菌的實驗進行確診，回答下列問題：

（1）微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、________。為從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后取0.1 mL滴于培養(yǎng)基表面，用無菌_____________涂勻，這種接種方法稱為涂布平板法。

（2）制備圖1中的液體培養(yǎng)基時采取高壓蒸汽滅菌法滅菌，鍋內(nèi)水加熱煮沸后，必須 ___________，以保證滅菌溫度達到121℃。滅菌的目的是_____________。

（3）圖2中接種工具的名稱是________，灼燒后必須先將接種工具冷卻的原因是____________________。

（4）據(jù)圖1分析，接種可疑菌后，經(jīng)35 ℃培養(yǎng)24小時，液體培養(yǎng)基變渾濁，對照組試管中應加入________，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組______________（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。原理是實驗組中_____，溶液變澄清。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、(和生長因子) 涂布器(玻璃刮鏟) 將鍋內(nèi)冷空氣徹底排除 殺死全部微生物，包括芽孢和孢子 接種環(huán) 避免高溫殺死接種物 等量生理鹽水 低 噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細菌死亡

【解析】

①為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)基質(zhì)的是培養(yǎng)基；雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、無機鹽、碳源和氮源，此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及氧氣的需求。②純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法是指通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法是指將菌液進行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液用涂布器(玻璃刮鏟)分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。③獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。④依題意和分析圖1可知：該實驗的自變量為是否加入噬菌體。該實驗的原理是：加入的噬菌體能夠特異性地侵染炭疽桿菌，導致炭疽桿菌裂解死亡，使溶液變澄清。⑤圖2中的接種工具是接種環(huán)。

(1) 微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、碳源、氮源、(和生長因子)。采用涂布平板法接種微生物時使用的接種工具為涂布器(玻璃刮鏟)。

(2) 用高壓蒸汽滅菌法對液體培養(yǎng)基進行滅菌時，鍋內(nèi)水加熱煮沸后，必須將鍋內(nèi)冷空氣徹底排除，以保證滅菌溫度達到121℃。滅菌的目的是殺死全部微生物，包括芽孢和孢子。

(3) 圖2中的接種工具是接種環(huán)。為了避免高溫殺死接種物，對于灼燒后的接種環(huán)，必須先將其冷卻后才能用于劃線操作。

(4) 接種可疑菌后，該菌大量繁殖，導致培養(yǎng)液變渾濁。圖1顯示：實驗組加入的是用生理鹽水配制的澄清噬菌體液，據(jù)此可推知：對照組試管中應加入等量生理鹽水。加入的噬菌體能夠特異性地侵染炭疽桿菌，若該患者被炭疽桿菌感染，則培養(yǎng)液中的炭疽桿菌會因裂解死亡而使其數(shù)量下降，進而降低培養(yǎng)液的渾濁度，所以若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此實驗的原理是：實驗組中加入的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細菌死亡，溶液變澄清。