Question

12．科學(xué)家將荒漠植物中的耐鹽基因轉(zhuǎn)移到萵苣細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽萵苣新品種．在培育過程中用到了EcORⅠ、SmaⅠ、NaeⅠ三種限制酶，如圖依次表示EcORⅠ、SmaⅠ、NaeⅠ三種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)．請(qǐng)回答下列問題：

（1）限制酶主要是從原核（生物）中分離純化而來的，限制酶能將雙鏈DNA分子中的磷酸二酯鍵（化學(xué)鍵）斷開．DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的片段末端有兩種形式--黏性末端、平末端．
（2）請(qǐng)繪出EcORⅠ切割DNA分子后產(chǎn)生的末端，SmaⅠ和NaeⅠ切割形成的DNA片段之間能（填“能”或“不能”）連接形成重組DNA分子．
（3）將生長至四葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度食鹽（NaCl）溶液中培養(yǎng)，進(jìn)行耐鹽試驗(yàn)，用非轉(zhuǎn)基因幼苗作為對(duì)照，培養(yǎng)30天后觀察現(xiàn)象．若轉(zhuǎn)基因植株正常生長，則說明轉(zhuǎn)基因植株獲得了耐鹽特性．

Answer 1

分析 基因工程的基本工具
1、“分子手術(shù)刀”--限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）
（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的．
（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．
（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．
2、“分子縫合針”--DNA連接酶
（1）兩種DNA連接酶（E•coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶）的比較：
①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵．
②區(qū)別：E•coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T₄DNA連接酶來源于T₄噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低．

解答 解：（1）限制酶主要是從原核中分離純化而來的，限制酶能將雙鏈DNA分子中的磷酸二酯鍵斷開．DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的片段末端有兩種形式：黏性末端、平末端．
（2）根據(jù)圖中EcORⅠ限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)可知，EcORⅠ切割DNA分子后產(chǎn)生的末端；SmaⅠ和NaeⅠ切割形成的DNA片段均為平末端，因此兩種片段之間能連接形成重組DNA分子．
（3）將生長至四葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度食鹽（NaCl）溶液中培養(yǎng)，進(jìn)行耐鹽試驗(yàn)，用非轉(zhuǎn)基因幼苗作為對(duì)照，培養(yǎng)30天后觀察現(xiàn)象．若轉(zhuǎn)基因植株正常生長，則說明轉(zhuǎn)基因植株獲得了耐鹽特性．
故答案為：
（1）原核       磷酸二酯鍵        黏性末端        平末端
（2）       能
（3）高濃度食鹽（NaCl）溶液      轉(zhuǎn)基因植株正常生長

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．