Question

4．埃博拉病毒（EBOV）是一種能導(dǎo)致人類及脊椎動(dòng)物出血熱的致死性病毒，目前正在全世界流行，EBOV的NP蛋白在病毒復(fù)制中具有重要作用，也是診斷該病重要的靶蛋白，如圖是某科研機(jī)構(gòu)研制抗NP蛋白單克隆抗體的流程圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）①過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化，②過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶催化．
（2）完整的NP蛋白基因表達(dá)載體必須包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部分．
（3）制備該單克隆抗體時(shí)，免疫動(dòng)物的抗原是NP蛋白，它會(huì)引起小鼠產(chǎn)生體液免疫，進(jìn)而分泌抗體．
（4）過(guò)程③常采用的生物促融方法是用滅活的病毒處理，然后通過(guò)克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)可獲得X細(xì)胞，該細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
2、基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)．
3、分析圖解：圖中①過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄，逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶，②過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程中需要利用限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體三種工具．

解答 解：（1）圖中①過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄，逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶，②過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要限制酶和DNA連接酶催化．
（2）完整的NP蛋白基因表達(dá)載體必須包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部分．
（3）制備該單克隆抗體時(shí)，免疫動(dòng)物的抗原是NP蛋白，它會(huì)引起小鼠產(chǎn)生體液免疫，進(jìn)而分泌抗體．
（4）過(guò)程③常采用的生物促融方法是用滅活的病毒處理，然后通過(guò)克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)可獲得X細(xì)胞即雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄酶       限制酶和DNA連接酶
（2）目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因
（3）NP蛋白         體液
（4）滅活的病毒        專一抗體檢測(cè)       既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體

點(diǎn)評(píng) 本題以圖形為載體，考查單克隆抗體的制備過(guò)程、免疫調(diào)節(jié)和基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論能力．