Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題。

（一）回答下列有關(guān)發(fā)酵食品生產(chǎn)工藝的問題：

（1）豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。影響豆豉風(fēng)味的主要因素，除了菌種類型、發(fā)酵溫度、pH、氧氣等環(huán)境因素，還有________（答2個因素）。

（2）目前的豆豉發(fā)酵基本是一次性的，每次都經(jīng)過“培養(yǎng)基滅菌→___→發(fā)酵→提取”，周而復(fù)始。能否________發(fā)酵、生產(chǎn)、提取是今后的發(fā)展方向。

（3）根據(jù)所學(xué)知識判斷，下面哪種微生物更適合用豆芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)_________

A醋桿菌B酵母菌C乳酸菌D農(nóng)桿菌

（4）在果醋發(fā)酵工藝中，用谷殼糠等將醋桿菌固定化，裝在發(fā)酵瓶，下端直角玻璃管中塞____________用以過濾空氣；物料瓶內(nèi)裝___________________，鋁箔封口。發(fā)酵過程若流速過快，則可能導(dǎo)致____________，為保障品質(zhì)，需對發(fā)酵瓶流出液________________。

（二）為開發(fā)利用沿海灘涂鹽堿地，我國科學(xué)家應(yīng)用基因工程培育出了耐鹽堿水稻新品系，大大提高了水稻等農(nóng)作物的種植面積，增加了糧食產(chǎn)量。據(jù)此請回答下列問題：

（1）欲將耐鹽堿基因和Ti質(zhì)粒進(jìn)行重組形成重組質(zhì)粒需要的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和____________，限制酶一般需要________種，這樣設(shè)計(jì)的目的是____________。

（2）將重組Ti質(zhì)粒構(gòu)建完成后導(dǎo)入農(nóng)桿菌，經(jīng)篩選后，對含目的基因的農(nóng)桿菌進(jìn)行大量繁殖，其目的是____________。

（3）取田間水稻的幼胚經(jīng)消毒后接種到____________（固體、半固體、液體）培養(yǎng)基上誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，利用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織后，將其接種到MS生根培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素具有解除高濃度生長素____________的作用。

（4）經(jīng)組培獲得水稻試管苗后，提取其葉片組織中的DNA，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，目的是為了____________。要檢測到轉(zhuǎn)基因水稻中目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，一般采用的方法是_________。

Answer 1

【答案】大豆品種（原料）、發(fā)酵時間 接種 連續(xù)地 B 脫脂棉球 酒水混合物 發(fā)酵不充分 定期檢測/監(jiān)控（答到一個詞給分） DNA連接酶 2 防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化以及定向連接 獲取大量重組質(zhì)粒（讓目的基因擴(kuò)增 或克隆目的基因 ） 半固體 抑制根生長 檢測目的基因是否成功導(dǎo)入 抗原-抗體反應(yīng)

【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；

（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：

當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿帷?/span>

3、基因工程的操作步驟：一是獲取目的基因；二是構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心）；三是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（導(dǎo)入植物細(xì)胞一般有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管道法等）；四是檢測和鑒定目的基因（一是檢測目的基因是否導(dǎo)入成功，二是檢測目的基因是否成功表達(dá)，三是檢測目的基因控制的性狀是否在能在植株上表現(xiàn)出來）。

（一）（1）影響豆豉風(fēng)味的因素很多，包括菌種類型、發(fā)酵溫度、pH、氧氣等環(huán)境因素還有發(fā)酵的大豆品種原料和發(fā)酵時間。

（2）發(fā)酵過程利用了微生物的代謝，因此培養(yǎng)過程要經(jīng)過“培養(yǎng)基滅菌→接種→發(fā)酵→提取”。這種發(fā)酵技術(shù)基本上是一次性的，因此如何連續(xù)性低發(fā)酵、生產(chǎn)、提取是今后的發(fā)展方向。

（3）豆芽汁培養(yǎng)基適合培養(yǎng)真菌，選項(xiàng)中只有酵母菌屬于真菌，故選B。

（4）醋酸菌是好氧細(xì)菌，下端直角玻璃管中塞脫脂棉球用以過濾空氣。物料瓶內(nèi)裝酒水混合物，鋁箔封口。發(fā)酵過程若流速過快，則可能導(dǎo)致發(fā)酵不充分，為保障品質(zhì)，需對發(fā)酵瓶流出液進(jìn)行定期檢測。

（二）（1）重組質(zhì)粒構(gòu)建過程中，用的工具酶包括限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，其中限制性核酸內(nèi)切酶一般用兩種，這樣防止目的基因和質(zhì)粒發(fā)生自身環(huán)化以及定向連接。

（2）為了獲取大量重組質(zhì)粒，可對含目的基因的農(nóng)桿菌進(jìn)行大量繁殖。

（3）愈傷組織的培養(yǎng)采用的是半固體培養(yǎng)基。生長素具有兩重性，低濃度促進(jìn)生長，高濃度抑制生長，在MS生根培養(yǎng)基上，細(xì)胞分裂素具有解除高濃度生長素抑制生根的作用。

（4）提取葉片組織的DNA，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入。對于檢測轉(zhuǎn)基因水稻中目的基因是否表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交方法。