Question

【題目】某生物活動小組為測定當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細菌的數(shù)量，進行了隨機取樣、系列梯度稀釋、涂布平板、培養(yǎng)、計數(shù)等步驟，實驗操作如下：

請分析并回答下列問題：

（1）為了篩選和分離尿素分解菌，培養(yǎng)基中需要添加____________作為唯一氮源，除了必需的營養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基中還需要添加____________。尿素分解菌能產(chǎn)生脲酶，把尿素分解成____________。

（2）在上述系列梯度稀釋時，吸取前一試管（或錐形瓶）中l(wèi)mL菌液到后一試管的工具是____________，該工具在使用前需要進行____________滅菌。

（3）實驗結(jié)果：3號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為560、601、24，4號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為57、59、61，5號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為8、15、28。該10克土壤樣品中含有尿素分解菌的估算數(shù)目是____________。通過該方法計算出來的數(shù)值往往比實際值低，原因是____________。在進行實驗時，除了涂布的三個平板外，還需要至少準(zhǔn)備一個空白培養(yǎng)培養(yǎng)基做對照，目的是____________。

Answer 1

【答案】 尿素 瓊脂 C02和NH3 移液管 干熱 5.9×108 可能存在2個或2個以上的活菌形成一個菌落的情況 檢測培養(yǎng)基是否被污染

【解析】【試題分析】

本題主要考查尿素分解菌的篩選與分離過程的稀釋與計數(shù)，以及所用的培養(yǎng)基，意在考查考生的識圖能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力�？忌�要明確圖中5支試管為梯度稀釋，最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進行計數(shù)，然后再根據(jù)選項涉及的內(nèi)容回憶相關(guān)知識點即可分析作答。

（1）為了篩選和分離尿素分解菌，培養(yǎng)基中需要添加尿素作為唯一氮源；用稀釋涂布平板法分離純化細菌時需要將細菌接種到瓊脂固體培養(yǎng)基上，所以除了必需的營養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基中還需要添加瓊脂作凝固劑；尿素分解菌能產(chǎn)生脲酶，把尿素分解成C02和NH3。

（2）在上述系列梯度稀釋時，吸取前一試管（或錐形瓶）中l(wèi)mL菌液到后一試管的工具是移液管，移液管屬于能耐高溫的、需要保持干燥的物品，所以移液管在使用前需要進行干熱滅菌。

（3）為了使實驗結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。根據(jù)實驗結(jié)果可知，應(yīng)選擇4號試管涂布的三個平板進行計數(shù)。4號試管涂布的三個平板上生長的平均菌落數(shù)C＝(57＋59＋61)÷3＝59個，涂布平板時所用的稀釋液的體積V＝0.1mL，4號試管的稀釋倍數(shù)M＝105，根據(jù)計算公式可知，每克樣品中的菌種數(shù)＝(C÷V)×M＝(59÷0.1)×105＝5.9×107，則該10克土壤樣品中含有尿素分解菌的估算數(shù)目是5.9×107×10＝5.9×108；該方法計數(shù)過程中，可能存在2個或2個以上的活菌形成一個菌落的情況，所以計算出來的數(shù)值往往比實際值低；在進行實驗時，除了涂布的三個平板外，還需要至少準(zhǔn)備一個空白培養(yǎng)培養(yǎng)基做對照，目的是檢測培養(yǎng)基是否被污染。