(四)生物技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、工業(yè)等領(lǐng)域.下列是與生物工程類相關(guān)的問題:
Ⅰ.生物柴油是一種可再生的清潔能源,其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗,科學(xué)家發(fā)現(xiàn),在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下,植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油(如下圖).
(1)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí),選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長提供
,培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是
法.
(2)可利用
技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用.
(3)若需克隆脂肪酶基因,可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的
技術(shù).
Ⅱ.生長激素在治療激素分泌過少的矮小癥方面有積極的作用.為了批量生產(chǎn)生長激素,可以采取轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制生長激素合成的基因轉(zhuǎn)移到微生物細(xì)胞內(nèi).
下列是涉及此轉(zhuǎn)基因技術(shù)的幾種限制酶識別序列及其割位點(diǎn);圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶對質(zhì)粒和供體DNA的切割位點(diǎn):
請回答下列問題:
(1)四種酶切位點(diǎn)相比較,Sma I酶切位點(diǎn)結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定,原因是
(2)用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用Sma I切割,原因是
.
(3)與只是用EcoR I 相比較,使用BamH I和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、目的基因的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止
.
(4)為了檢測基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的成功,需要在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入
,若微生物能正常生長,說明轉(zhuǎn)導(dǎo)成功.