Question

10．科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗腫瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重視．臨床使用發(fā)現(xiàn)此蛋白質(zhì)對(duì)腫瘤確實(shí)有良好的療效，可以通過(guò)基因工程技術(shù)導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)進(jìn)行大量生產(chǎn)．其過(guò)程大體如圖1所示：

（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有鳥(niǎo)槍法、人工合成法、PCR（至少寫(xiě)出兩種）．
（2）圖中a過(guò)程叫構(gòu)建基因表達(dá)載體，它是基因操作的核心步驟，該過(guò)程中切質(zhì)粒和目的基因的限制酶可以不同，但是產(chǎn)生的粘性末端要滿足嚴(yán)格互補(bǔ)條件．
（3）將抗腫瘤基因?qū)�入大腸桿菌，并在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)產(chǎn)生了抗腫瘤蛋白，由于大腸桿菌具有繁殖快、代謝速度快特點(diǎn)，因此在短時(shí)間內(nèi)就能獲得大量的抗腫瘤蛋白．
（4）細(xì)胞工程可以作為輔助手段，通過(guò)獲得特定的單克隆抗體并與抗腫瘤蛋白結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，以實(shí)現(xiàn)“靶向殺癌”．如圖2所示是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：
①圖中A過(guò)程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細(xì)胞”是B細(xì)胞，要獲得能產(chǎn)生抗腫瘤蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞至少要經(jīng)過(guò)二次篩選．從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，給小鼠注射的特定的物質(zhì)是特異性的抗原．
②為檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞是否成功的合成了單克隆抗體，可以采用抗原抗體雜交的方法．

Answer 1

分析 分析圖解：
圖1，圖中a表示構(gòu)建的基因載體，然后將目的基因?qū)�入大腸桿菌．
圖2表示單克隆抗體制備的過(guò)程，圖中A表示從小鼠的脾臟中獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞，B表示動(dòng)物細(xì)胞融合．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有鳥(niǎo)槍法、人工合成法、PCR．
（2）圖中a過(guò)程叫構(gòu)建基因表達(dá)載體，它是基因操作的核心步驟，該過(guò)程中切質(zhì)粒和目的基因的限制酶可以不同，但是兩者產(chǎn)生的粘性末端必須能夠堿基互補(bǔ)配對(duì)．
（3）大腸桿菌具有繁殖快、代謝速度快特點(diǎn)，因此將抗腫瘤基因?qū)�入大腸桿菌，并在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)產(chǎn)生了抗腫瘤蛋白，可以在短時(shí)間內(nèi)就能獲得大量的抗腫瘤蛋白．
（4）①單克隆抗體的制備過(guò)程中，采用的是已免疫的小鼠B細(xì)胞（漿細(xì)胞或效應(yīng)B細(xì)胞），即經(jīng)過(guò)注射特異性抗原，然后和骨髓瘤細(xì)胞的融合，需要經(jīng)過(guò)至少兩次篩選（第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選獲得能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞），最終篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞．
②為檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞是否成功的合成了單克隆抗體，可以采用抗原抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）鳥(niǎo)槍法、人工合成法、PCR
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體 嚴(yán)格互補(bǔ)
（3）繁殖快 代謝速度快
（4）B 二  特異性的抗原 抗原抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能結(jié)合圖解準(zhǔn)確答題．