Question

16．有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境．研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解．分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示．

（1）微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、氮源與無機鹽四類，該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖．
（2）為了獲得純凈的培養(yǎng)物，無菌技術(shù)非常關(guān)鍵．無菌技術(shù)除了防止實驗室的培養(yǎng)物被其他微生物污染外，還可以避免操作者自身被微生物污染．
（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)．劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落．造成劃線無菌落可能的操作失誤有①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始（至少答2點）．
（4）為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液作圖乙所示實驗．該實驗的假設(shè)是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)，該實驗設(shè)計是否合理？為什么？不合理，缺少空白對照．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是探索苯磺隆降解機制的實驗過程，圖甲中，首先用選擇培養(yǎng)基從土壤中篩選出菌種，再采用平板劃線法純化出相應的菌種；圖乙中：通過測定苯磺隆的濃度測定其降解率．據(jù)此答題．

解答 解：（1）微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽四類營養(yǎng)．該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，因為只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖．
（2）無菌技術(shù)除了防止實驗室的培養(yǎng)物被其他微生物污染外，還可以避免操作者自身被微生物污染．
（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)．劃線接種時，在第一區(qū)域劃線后須將該工具灼燒滅菌后再劃線，在第二次劃線時須從第一次劃線的末端開始，這樣做的目的是將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基上．
（4）從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實驗假設(shè)是目的菌株通過分泌某種蛋白質(zhì)來降解苯磺隆，但是尚需設(shè)置不加入蛋白酶的對照組實驗，否則沒有說服力，因而不合理．
故答案為：
（1）無機鹽     只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖
（2）避免操作者自身被微生物污染
（3）接種環(huán)    ①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始
（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)          不合理，缺少空白對照

點評 本題結(jié)合探究實驗過程，考查微生物的培養(yǎng)和分離、探究實驗等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；掌握分離微生物常用的兩種方法及操作過程；掌握探究實驗的原則，能結(jié)合圖中信息知識答題．