Question

4．下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖：

請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄（或“反轉(zhuǎn)錄”）酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有引物、模板（A基因）、4種脫氧核苷酸三磷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合（或“Taq”）酶，擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成．
（3）在基因工程中，利用大腸桿菌生產(chǎn)胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子，其中啟動(dòng)子的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用Ca²⁺處理大腸桿菌，其目的是使其成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于吸收重組DNA分子．為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可利用分子雜交技術(shù)；為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA是否翻譯成蛋白質(zhì)，常用抗原-抗體雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運(yùn)載體（質(zhì)粒），C為重組質(zhì)粒，D為受體細(xì)胞．

解答 解：（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過(guò)人工合成（化學(xué)）方法合成所需基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)所需的條件：引物、模板DNA（目的基因或A基因）、原料（4種脫氧核糖核苷酸）和耐熱性的DNA聚合酶等．
（3）在基因工程中，利用大腸桿菌生產(chǎn)胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子，其中啟動(dòng)子的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用Ca²⁺處理大腸桿菌，其目的是使其成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于吸收重組DNA分子．為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可利用分子雜交技術(shù)；為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA是否翻譯成蛋白質(zhì)，常用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄（或“反轉(zhuǎn)錄”）                    脫氧核苷酸
（2）引物      模板（A基因）（兩空可調(diào)換位置）    熱穩(wěn)定DNA聚合（或“Taq”）
（3）RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位     Ca²⁺     感受態(tài)      分子雜交        抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合制備“工程菌”的示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．