Question

【題目】（生物——選修l：生物技術(shù)實(shí)踐）

自1964年印度科學(xué)家培養(yǎng)曼陀羅花藥獲得單倍體植株后，花藥離體培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展迅速，據(jù)記載，現(xiàn)在已經(jīng)有250多種高等植物的花藥培養(yǎng)成功。

(1)組培中，常采用_____培養(yǎng)基，主要包括的成分有水、大量元素、________、有機(jī)物，還需要添加植物激素。

(2)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的使用順序和用量會(huì)影響到植物細(xì)胞的發(fā)育方向。如，為了有利于細(xì)胞分裂而不分化，兩種激素的使用順序?yàn)椋?/span>__________�；ǚ壑仓戤a(chǎn)生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成___________。

(3)進(jìn)行月季花藥離體培養(yǎng)一般選擇在五月初到五月中旬。對(duì)于花粉而言，要采用______期的花粉，為了鑒定該時(shí)期的花粉，常采用醋酸洋紅法進(jìn)行染色鑒定。若是某些植物花粉細(xì)胞不易著色，常采用_______法染色，能將花粉的細(xì)胞核染成_______色。

(4)消毒后的花蕾，在無(wú)菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時(shí)，盡量不要損傷花藥，同時(shí)要將__________徹底去除。

Answer 1

【答案】MS固體 微量元素 先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素 胚狀體 單核（單核居中到單核靠邊） 焙花青鉻礬法 藍(lán)黑 花絲

【解析】

1、組織培養(yǎng)常用的MS培養(yǎng)基含大量元素、微量元素、有機(jī)物，有機(jī)物包括甘氨酸、維生素B1、維生素B6、煙酸、肌醇、蔗糖、瓊脂等，還需要添加植物生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，微生物培養(yǎng)基不含有植物激素．MS培養(yǎng)基含氨基酸，如甘氨酸，含碳源，如蔗糖，含維生素B1和維生素B6。

2、細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的使用順序不同，培養(yǎng)的結(jié)果不同．先使用生長(zhǎng)素，再使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化；兩者同時(shí)使用，細(xì)胞分化頻率提高。

3、在植物組織培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽．因此從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過(guò)那一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中激素的種類(lèi)及其濃度配比；由花粉離體培養(yǎng)得到的是植株是單倍體植株，這也說(shuō)明成熟花粉細(xì)胞具有全能性。

4、通常選擇植物單核期的花藥培養(yǎng)成功率最高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染成紅色鏡檢，對(duì)不易著色的則用焙花青-鉻礬法對(duì)其染色，顏色是藍(lán)黑色。

（1）植物組織培養(yǎng)常采用的培養(yǎng)基為MS固體培養(yǎng)基；MS固體培養(yǎng)基的組成成分有水、大量元素、微量元素、有機(jī)物，還必須添加植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。

（2）先加生長(zhǎng)素，后加細(xì)胞分裂素可以使細(xì)胞分裂而不分化；花藥離體培養(yǎng)的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成胚狀體。

（3）進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)時(shí)，一般選擇單核期（或單核居中期到單核靠邊期）的花粉成功率最高；鑒定花粉發(fā)育時(shí)期時(shí)，需要對(duì)染色體進(jìn)行染色，一般采用醋酸洋紅法進(jìn)行染色，對(duì)于某些植物的花粉不易著色，可以采用焙花青鉻礬法進(jìn)行染色，可以將細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。

（4）花藥離體培養(yǎng)時(shí)，剝離花藥時(shí)，盡量不要損傷花藥，同時(shí)要將花絲徹底去除，防止得到正常染色體數(shù)目的個(gè)體。