Question

12．利用基因工程的技術手段可以生產(chǎn)抗性植株．在研究并大面積種植只含一種抗蟲基因的轉(zhuǎn)基因甘藍以后，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，小菜蛾種群對該種甘藍產(chǎn)生的毒蛋白具有更強的抗性．
（1）基因工程技術手段的核心是構建目的基因表達載體，與雜交育種相比基因工程的優(yōu)點在于克服了遠緣雜交不親和的障礙．在供體細胞中提取目的基因需要用到限制酶，此酶的作用特點是識別特定的核苷酸序列并在特定的位點切割．
（2）抗蟲基因能在甘藍植株內(nèi)成功表達是因為共用一套遺傳密碼子，檢測A基因和B基因在細胞中是否得到轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交技術，檢測目的基因是否翻譯可采用抗原-抗體雜交技術．
（3）用基因工程的手段獲得含有抗性基因的甘藍細胞，運用的原理是基因重組，甘藍細胞培育成抗性植株運用的技術手段稱為植物組織培養(yǎng)技術，該技術的理論基礎是植物細胞的全能性．
（4）將抗性基因?qū)�入甘藍細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是構建目的基因表達載體．在供體細胞中提取目的基因需要用到限制性核酸內(nèi)切酶；限制酶具有特異性，即識別特定的堿基序列，并在特定的位點切割．
（2）由于自然界所有生物共有一套遺傳密碼子，所以一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達．檢測目的基因在受體細胞中是否得到轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交法．檢測目的基因是否翻譯可采用抗原-抗體雜交技術．
（3）用基因工程的手段獲得含有抗性基因的甘藍細胞，運用的原理是基因重組，甘藍細胞培育成抗性植株運用的技術手段稱為植物組織培養(yǎng)技術，該技術的理論基礎是植物細胞的全能性．
（4）由于甘藍細胞是植物細胞，所以將抗性基因?qū)�入甘藍細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．
故答案為：
（1）構建目的基因表達載體     遠緣雜交不親和的障礙   限制   識別特定的核苷酸序列并在特定的位點切割
（2）共用一套遺傳密碼子   分子雜交    抗原-抗體雜交
（3）基因重組    植物組織培養(yǎng)技術   植物細胞的全能性   
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需用注意的細節(jié)問題，并能結(jié)合所學的知識準確答題．