Question

紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機能主要是由血紅蛋白完成的．血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂或CO₂．我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白．請回答下列有關(guān)問題．
（1）血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：

 

、

 

、

 

和

 

．
（2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液．
①加入檸檬酸鈉的目的是

 

．
②以上所述的過程即是樣品處理，它包括

 

、

 

、收集血紅蛋白溶液．
（3）收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離．
①透析的目的是

 

；
②透析的原理是

 

．
（4）然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定．
①樣品純化的目的是

 

．
②血紅蛋白有什么特點？

 

．
這一特點對進行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？

 

．

Answer 1

考點：蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：本題是對血紅蛋白的提取和分離的實驗的考查，回憶血紅蛋白的提取和分離的實驗的實驗原理和操作步驟，然后結(jié)合題干信息進行解答．

解答： 解：（1）血紅蛋白的提取和分離一般分為4步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定．
（2）①采取血液時要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固．
②樣品處理又包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析4步．
（3）①透析即是血紅蛋白的粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜蛋白．
②透析的原理是透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)．
（4）①樣品的純化是通過膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去．
②血紅蛋白呈紅色，在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液，使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作程序．
故答案為：
（1）樣品處理　粗分離　純化　純度鑒定
（2）①防止血液凝固　
②紅細(xì)胞的洗滌　血紅蛋白的釋放
（3）①去除分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)　
②透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內(nèi)
（4）①通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去
②血紅蛋白呈紅色，在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液，這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作

點評：對血紅蛋白的提取和分離的實驗的實驗原理和具體操作方法的掌握是本題考查的重點．