Question

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定致畸、致癌作用的化學物質(zhì)，利用動物細胞培養(yǎng)的方法能夠鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強弱：請完成下列實驗報告。

I．實驗材料：小白鼠胚胎。

Ⅱ．藥品用具：胰蛋白酶液、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、細胞培養(yǎng)箱、載玻片、蓋玻片、光學顯微鏡、小白鼠正常體細胞有絲分裂高倍顯微鏡照片。

Ⅲ．實驗原理： ，根據(jù)這些變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)（以下稱Q值），可判斷該化學物質(zhì)的毒性。

Ⅳ．實驗步驟：

（1）制備細胞懸液：把小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加人胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸液。

（2）進行細胞培養(yǎng)：

①取A、B、C三個潔凈的培養(yǎng)瓶， 。

② 。

③ 。

（3）制作臨時裝片：

①當細胞繁殖到大約第8代左右時，同時從細胞培養(yǎng)箱中取出三個培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細胞從瓶壁上脫落，再加入動物細胞固定液迅速殺死細胞，將細胞固定在不同的分裂時期。

②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸液。滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片中央，加1—2滴一定濃度的 染色，3—5 min后，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計：把臨時裝片放在顯微鏡下，尋找處于有絲分裂中期的細胞，并與 對比以確認發(fā)生上述變異的細胞，同時統(tǒng)計該期變異的細胞占細胞總數(shù)的百分數(shù)（Q值）。

V．實驗結(jié)果：

培養(yǎng)瓶	A	B	C
Q值	1．3%	12．5%	0．1%

Ⅵ．實驗結(jié)論： 。

Answer 1