Question

【題目】甲、乙兩同學(xué)學(xué)習(xí)完微生物的實驗室培養(yǎng)與分離后，要利用所學(xué)知識研究環(huán)境中微生物的情況。請回答相關(guān)問題：

Ⅰ.甲同學(xué)為了檢測飲用水中是否會有某種細菌，配制如下培養(yǎng)基進行培養(yǎng)：

蛋白胨	10 g
乳糖	5 g
蔗糖	5 g
K2HPO4	2 g
蒸餾水	1000 mL
將pH調(diào)到7.2

（1）該培養(yǎng)基所含有的碳源有___________；培養(yǎng)基的制備包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，最后一步待培養(yǎng)基冷卻至______左右時，在_________火焰附近倒平板。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行______(“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需進行清潔和________(“消毒”或“滅菌”)。

（3）對獲得的菌種可以依據(jù)菌落的 _________________特征對細菌進行初步的鑒定。

Ⅱ.乙同學(xué)是從土壤中分離分解尿素細菌的相關(guān)實驗。

（1）在培養(yǎng)基中加入______指示劑，可初步鑒定出該種細菌是否分解尿素。

（2）為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種后的培養(yǎng)基倒置于_____________中培養(yǎng)。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種等量的_______作為對照進行實驗。

（3）該同學(xué)利用 _____________法統(tǒng)計土壤樣品中尿素分解菌的菌落數(shù)時，1g樣品被稀釋106倍后，每個嚴格滅菌的培養(yǎng)皿中用了0.5ml稀釋液，最終所用的5個培養(yǎng)皿所得的菌落數(shù)分別是112、132、141、130、140，則每克樣品中的菌株數(shù)為_______________。

Answer 1

【答案】 蔗糖、乳糖和蛋白胨 50℃ 酒精燈 滅菌 消毒 形狀、大小、顏色和隆起程度等 酚紅 恒溫培養(yǎng)箱 無菌水 稀釋涂布平板法 2.62×108

【解析】【試題分析】

本題考查微生物的培養(yǎng)和分離計數(shù)的相關(guān)知識。題目比較簡單，解題思路是根據(jù)題意梳理相關(guān)基礎(chǔ)知識，然后結(jié)合題目要求分析作答即可。

Ⅰ. （1）由表格內(nèi)容可知，該培養(yǎng)基的碳源主要是乳糖、蔗糖，蛋白胨做為主要的氮源也能提供碳源；培養(yǎng)基的制備包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，最后一步待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。

（2）消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行滅菌；操作者的雙手需進行清潔和消毒。

（3） 當單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，便會形成一個肉眼可見的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，稱為菌落。每種細菌在一定條件下形成的菌落，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。因此，對獲得的菌種可以依據(jù)菌落的形狀、大小、顏色和隆起程度等特征對細菌進行初步的鑒定。

Ⅱ. （1）在細菌分解尿素的反應(yīng)中，細菌產(chǎn)生的脲酶可將尿素分解成為氨。為證明分離得到的細菌是否可以分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若該指示劑變紅，則可初步鑒定該細菌可以分解尿素。

（2）要想使微生物快速地繁殖，就要置于適宜的條件下，特別是溫度，所以要將接種后的培養(yǎng)基倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種等量的無菌水作為對照進行實驗。

（3）常用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)。每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，本實驗中的C＝（112＋132＋141＋130＋140）÷5＝131，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積，本實驗中的V＝0.5mL，M代表稀釋倍數(shù)，本實驗中的M＝106，因此，每克樣品中的菌株數(shù)為（131÷0.5）×106＝2.62×108。