Question

7．福建山區(qū)發(fā)現(xiàn)一種珍稀植物水晶蘭，全草含藥用價值很高的水晶蘭甙．某科研所將水晶蘭甙基因?qū)�入玉米中制備出能合成水晶蘭甙的玉米愈傷組織細胞，流程圖如圖．回答下列問題：

（1）HindⅢ和BamHⅠ等限制酶主要是從原核生物（或微生物）中分離純化得到的，都作用于DNA特定部位的磷酸二酯鍵．使用HindⅢ和BamHⅠ兩種酶切割Ti質(zhì)�？煞乐骨虚_的質(zhì)粒重新連接起來，原因是兩種限制酶切割后產(chǎn)生不同的黏性末端．圖中②過程需要加入DNA連接酶．
（2）基因工程使用的運載體除質(zhì)粒外，還常用動植物病毒、λ噬菌體衍生物等．若需要大量合成目的基因，可采用PCR技術(shù)進行擴增，其條件除需模板、原料外，還需熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物等．
（3）圖中生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因玉米的核心步聚是②（填標號）．將目的基因?qū)�入玉米細胞的方法為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這種方法的優(yōu)點是能使目的基因隨著Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物細胞的染色體DNA上，使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．
（4）④過程是脫分化，過程⑤中可以用抗原-抗體雜交技術(shù)進行檢測篩選．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是將水晶蘭甙基因?qū)�入玉米中制備出能合成水晶蘭甙的玉米愈傷組織細胞，其中①是獲取目的基因的過程，②是基因表達載體的構(gòu)建過程，③是將目的基因?qū)�入受體細胞的過程，④是脫分化過程，⑤是檢測玉米愈傷組織細胞是否合成水晶蘭甙，常用抗原-抗體雜交技術(shù)．

解答 解：（1）限制酶主要是從原核生物（或微生物）中分離純化得到的，限制酶都作用于DNA特定部位的磷酸二酯鍵．使用HindⅢ和BamHⅠ兩種酶切割Ti質(zhì)粒后產(chǎn)生不同的黏性末端，可防止切開的質(zhì)粒重新連接起來．圖中②過程表示將目的基因和質(zhì)粒連接，需要加入DNA連接酶．
（2）基因工程使用的運載體除質(zhì)粒外，還常用動植物病毒、λ噬菌體衍生物等．若需要大量合成目的基因，可采用PCR技術(shù)進行擴增，其條件除需模板、原料外，還需熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物等．
（3）圖中生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因玉米的核心步聚是基因表達載體的構(gòu)建，即圖中②過程．將目的基因?qū)�入玉米細胞的方法為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這種方法的優(yōu)點是能使目的基因隨著Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物細胞的染色體DNA上，使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．
（4）④過程表示脫分化，過程⑤檢測目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)可用抗原-抗體雜交法．
故答案為：
（1）原核生物（或微生物）      磷酸二酯      兩種限制酶切割后產(chǎn)生不同的黏性末端    DNA連接
（2）動植物病毒、λ噬菌體衍生物    熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物
（3）②農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    T-DNA   染色體DNA
（4）脫分化     抗原-抗體雜交

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學的知識準確答題．