Question

【題目】干擾素是一種重要的免疫活性物質(zhì)，具有抗病毒、調(diào)節(jié)免疫等功效。研究人員利用基因工程通過(guò)培育山羊乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)干擾素。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）基因工程獲取的人干擾素基因一般來(lái)自cDNA文庫(kù)，cDNA中______________（填“有”或沒(méi)有”）啟動(dòng)子。獲取的目的基因可通過(guò)______________大量擴(kuò)增，擴(kuò)增需要的條件有_______________。（至少答出3項(xiàng)）

（2）重組人干擾素基因表達(dá)載體由山羊酪蛋白基因啟動(dòng)子，人干擾素基因，標(biāo)記基因和終止等組成，其中______________決定了人干擾素基因只能在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)，將該重組表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞一般采用____________________________。

（3）一般需要將重組人干擾素基因表達(dá)載體導(dǎo)入______________（填“雄性”或“雌性”）胚胎細(xì)胞中。在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育成熟時(shí)，為了檢測(cè)羊奶中是否有人干擾素，可用______________方法。

（4）如果我們采用蛋白質(zhì)工程來(lái)合成人干擾素，可以通過(guò)______________，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需要。

Answer 1

【答案】沒(méi)有 PCR技術(shù) 模板DNA、原料、引物、耐熱的DNA聚合酶、高溫等 山羊酪蛋白基因啟動(dòng)子 顯微注射 雌性 抗原—抗體雜交 基因修飾或基因合成

【解析】

基因工程操作的四個(gè)基本步驟是：獲取目的基因，基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞和目的基因的檢測(cè)與鑒定。培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，一般用受精卵和胚胎干細(xì)胞作為受體細(xì)胞，因?yàn)檫@些細(xì)胞的全能性最大，易培養(yǎng)出一個(gè)新個(gè)體。當(dāng)動(dòng)物細(xì)胞作受體細(xì)胞時(shí)，一般采用顯微注射法將目的基因?qū)�入�?/span>

（1）cDNA文庫(kù)是生物某個(gè)時(shí)期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的，故與基因組文庫(kù)相比，cDNA中沒(méi)有啟動(dòng)子；獲得的目的基因可通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，進(jìn)行擴(kuò)增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，此外還需模板DNA、原料、耐熱的DNA聚合酶等條件。

（2）啟動(dòng)子能夠啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，重組人干擾素基因表達(dá)載體中的山羊酪蛋白基因啟動(dòng)子決定了人干擾素基因只能在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)；培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí)，常以受精卵為受體細(xì)胞，且將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法。

（3）雌羊能夠泌乳，故一般需要將重組人干擾素基因表達(dá)載體導(dǎo)入雌性胚胎細(xì)胞中；在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育成熟時(shí)，為了檢測(cè)羊奶中是否有人干擾素，可用抗原-抗體雜交的方法。

（4）蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，故對(duì)現(xiàn)有蛋白的改造應(yīng)通過(guò)基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)。