Question

3．請回答下列有關單克隆抗體的問題：
（1）從免疫的小鼠脾臟細胞中獲取B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤
細胞，該細胞既具備骨髓瘤細胞的迅速大量繁殖特點，又具備淋巴細胞的分泌專一抗體特點，經(jīng)過多次篩選，并通過體內培養(yǎng)或體外培養(yǎng)生產(chǎn)得到所需要的單克隆抗體．
（2）在單克隆抗體的制備過程中，運用的技術手段是細胞培養(yǎng)、細胞融合．
（3）在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長至細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制，要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，可以用胰蛋白酶處理；培養(yǎng)液添加一定量的抗生素，以防止雜菌污染；在含有5% CO₂的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）單克隆抗體與普通血清抗體相比較，最大優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，可大量制備．

Answer 1

分析 1、動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．2、動物細胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
3、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）已經(jīng)免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后形成雜交瘤細胞，該細胞既具備骨髓瘤細胞的迅速大量繁殖特點，又具備淋巴細胞分泌專一抗體的特點．
（2）在單克隆抗體的制備過程中，運用的技術手段是動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)．
（3）在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長至細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制；要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，可以用胰蛋白酶處理；培養(yǎng)液添加一定量的抗生素，以防止雜菌污染；在含有5% CO₂的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）單克隆抗體與普通血清抗體相比較，最大優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，可大量制備．
故答案為：
（1）雜交瘤    大量繁殖   分泌專一抗體
（2）細胞培養(yǎng)   細胞融合
（3）接觸抑制   胰蛋白酶   抗生素    維持培養(yǎng)液的pH
（4）特異性強、靈敏度高

點評 本題考查動物細胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備，要求考生識記動物細胞培養(yǎng)的過程及條件；識記制備單克隆抗體的原理及過程，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記層次的考查．