Question

PCR技術(shù)是一種DNA的擴(kuò)增技術(shù)，操作步驟簡介如下：
第一步：準(zhǔn)備反應(yīng)式溶液和模塊DNA．
A．配制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)溶液：
配方：按如下比例進(jìn)行配制：蒸餾水100、緩沖溶液15、氯化鎂溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、礦物油1（防止聚合酶在凍結(jié)時(shí)受傷害）；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一種各加5．
B．準(zhǔn)備要拷貝的DNA：
提取準(zhǔn)備要拷貝的DNA
（如可以用一牙簽輕刮口腔內(nèi)壁，將牙簽放入蒸餾水中搖動．加熱蒸餾水沸騰，使細(xì)胞破碎放出DNA．用離心機(jī)離心后，去除蒸餾水中較大的細(xì)胞碎片．這時(shí)上清液中就有了較純的DNA．）
第二步：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)．
①將要拷貝的DNA“B”放入反應(yīng)液“A”中．
②水浴加熱．首先，94℃，使DNA雙螺旋解旋，歷時(shí)1min；然后，56℃，使引物結(jié)合到DNA上，歷時(shí)90s；最后，72℃，用聚合酶使DNA拷貝，歷時(shí)90s．
③重復(fù)步驟②．每重復(fù)一次，即完成一次拷貝．
分析回答下列問題：
（1）以上材料可以說明

 

A．DNA的復(fù)制必須在活細(xì)胞內(nèi)才能完成
B．DNA能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成
C．在合適的條件下，非細(xì)胞環(huán)境也能進(jìn)行DNA復(fù)制
D．PCR技術(shù)是一種無性生殖技術(shù)
（2）為什么要加入兩種引物．

 

．引物的作用是什么？

 

．
（3）PCR技術(shù)中用到的DNA聚合酶，取自生長在溫泉中的一種細(xì)菌，就PCR技術(shù)來講，你認(rèn)為使用這種細(xì)菌中提取的酶較普通的動植物體內(nèi)提取的DNA聚合酶的優(yōu)勢是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用

專題：

分析：解答本題需識記有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．

解答： 解：（1）據(jù)材料可知，PCR為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．故說明在合適的條件下，非細(xì)胞環(huán)境也能進(jìn)行DNA復(fù)制．
（2）由于DNA分子兩條鏈?zhǔn)浅史聪蚱叫械�，DNA聚合酶不能從頭合成DNA分子，只能從3′端到5′端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，與DNA分子雙鏈中的一條鏈互補(bǔ)．故引物的作用是引導(dǎo)DNA分子的復(fù)制．
（3）PCR技術(shù)中用到的DNA聚合酶，取自生長在溫泉中的一種細(xì)菌，這種細(xì)菌中提取的酶較普通的動植物體內(nèi)提取的DNA聚合酶的不同點(diǎn)在于由于和高溫環(huán)境相適應(yīng)，故在較高溫下不會變性失活．
 故答案為：
（1）C
（2）DNA分子兩條鏈?zhǔn)浅史聪蚱叫械模珼NA聚合酶不能從頭合成DNA分子，只能從3′端到5′端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，與DNA分子雙鏈中的一條鏈互補(bǔ)　引導(dǎo)DNA分子的復(fù)制
（3）較高溫下不會變性失活

點(diǎn)評：本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識，對于此類試題，學(xué)生需對相關(guān)知識進(jìn)行歸納總結(jié)，構(gòu)建一定的知識網(wǎng)絡(luò)，本題意在考查學(xué)生的識記能力和理解能力．