Question

9．蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的Bt毒蛋白在害蟲的消化道內(nèi)能被降解成有毒的多肽，最終造成害蟲死亡，因此Bt基因廣泛用于培育轉(zhuǎn)基因抗蟲植物．
（1）培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉所需的目的基因來自蘇云金芽孢桿菌的基因組，再通過PCR技術(shù)擴增．PCR反應(yīng)中溫度呈現(xiàn)周期性變化，其中加熱到90～95℃的目的是DNA解鏈（變性、解旋、受熱變性后解鏈為單鏈），然后冷卻到55-60℃使引物與互補DNA鏈結(jié)合，繼續(xù)加熱到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下進行延伸（Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成）．
（2）限制酶主要是從原核生物（或微生物）中獲得，其特點是能夠識別DNA分子某種特定的核苷酸序列，并在特定位點切割DNA．
（3）科研人員培育某品種轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的過程中，發(fā)現(xiàn)植株并未表現(xiàn)抗蟲性狀．可能的原因是所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入，導(dǎo)入的基因未能準確表達．
（4）在基因表達載體中，目的基因的首端和尾端必須含有啟動子和終止子這樣目的基因才能準確表達．

Answer 1

分析 1、基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
2、PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸

過程	說明
變性	當(dāng)溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈
復(fù)性	溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合
延伸	72℃左右時，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸

解答 解：（1）根據(jù)題意可知，培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉所需的目的基因來自蘇云金芽孢桿菌的基因組，再通過PCR技術(shù)擴增．PCR反應(yīng)中溫度呈現(xiàn)周期性變化，其中加熱到90～95℃的目的是雙鏈DNA解聚為單鏈，然后冷卻到55-60℃使引物與互補DNA鏈結(jié)合，繼續(xù)加熱到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下進行延伸．
（2）限制酶主要是從原核生物（或微生物）中獲得，其特點是能夠識別DNA分子某種特定的核苷酸序列，并在特定位點切割DNA．
（3）科研人員培育某品種轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的過程中，發(fā)現(xiàn)植株并未表現(xiàn)抗蟲性狀．可能的原因是所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入，導(dǎo)入的基因未能準確表達．
（4）在基因表達載體中，目的基因的首端和尾端必須含有啟動子和終止子，這樣目的基因才能準確表達，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合位點，終止子終止基因的轉(zhuǎn)錄．
故答案為：
（1）蘇云金芽孢桿菌DNA解鏈（變性、解旋、受熱變性后解鏈為單鏈）  在DNA聚合酶作用下進行延伸（Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成）
（2）原核生物（或微生物）    特定的核苷酸序列
（3）所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入，導(dǎo)入的基因未能準確表達
（4）啟動子和終止子

點評 本題考查基因工程和PCR技術(shù)等知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟及應(yīng)用，掌握各操作步驟中的方法及相關(guān)事項；識記PCR技術(shù)的概念、原理及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識答題，屬于考綱識記層次的考查．