Question

1．下表是基因工程中幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)．圖是轉(zhuǎn)基因香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)．

限制酶	BamH	Hind	EcoR	Sma
識別序列及切割位點(diǎn)	↓ GGATCC CCTAGG ↑	↓ AAGCTT TTCGAA ↑	↓ GAATTC CTTAAG ↑	↓ CCCGGG GGGCCC ↑

（1）從轉(zhuǎn)基因香蕉培育圖中反映了質(zhì)粒作為運(yùn)載體的特點(diǎn)是有多個酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存，基因工程中還可以用噬菌體或動植物病毒作為運(yùn)載體．
（2）圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI酶切割，原因是SmaI酶會破壞目的基因和質(zhì)粒．
（3）圖是用BamHⅠ和HindⅢ（限制）酶進(jìn)行切割得到的目的基因．可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身環(huán)化．

Answer 1

分析 分析DNA分子片段圖：根據(jù)圖1中DNA片段兩側(cè)的黏性末端可知，左側(cè)是用限制酶BamHI切割形成的，右側(cè)是用限制酶HindⅢ切割形成的．
分析流程圖：①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌；③表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入香蕉組織細(xì)胞；④表示脫分化過程；⑤表示再分化過程．

解答 解：（1）質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來．基因工程中還可以用病毒（噬菌體或動植物病毒）作為運(yùn)載體．
（3）SmaI酶會破壞目的基因和質(zhì)粒的標(biāo)記基因（抗性基因），因此圖中構(gòu)建重組質(zhì)粒時不能使用SmaI酶切割．
（3）根據(jù)圖中DNA片段兩側(cè)的黏性末端可知，左側(cè)是用限制酶BamHI切割形成的，右側(cè)是用限制酶HindⅢ切割形成的，這樣可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身環(huán)化．
故答案為：
（1）有多個酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存           噬菌體或動植物病毒
（2）SmaI酶會破壞目的基因和質(zhì)粒
（3）BamHⅠ和HindⅢ

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖表，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具、操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的過程及條件，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．