Question

【題目】目前，胚胎基因和工程技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域越來(lái)越大，為人類生產(chǎn)、生活、醫(yī)療等方面服務(wù)。

（1）胚胎工程技術(shù)實(shí)際上是在體外條件下，對(duì)_________________（兩點(diǎn)）的一種模擬。為使供受體具有相同的生理環(huán)境，采取的措施是______________。為獲得同卵雙胎或多胎，采用的技術(shù)是_______，其繁殖方式是_________。

（2）基因工程中常用PCR技術(shù)擴(kuò)增有關(guān)基因，PCR反應(yīng)體系中需要加入dCTP、dGTP、dATP、dTTP，這四種物質(zhì)的兩個(gè)作用是：________和________�；�因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，下圖甲表示目的基因及限制酶切點(diǎn)，圖乙表示質(zhì)粒。操作過(guò)程中不選用的兩種限制酶是______，原因是__________。

Answer 1

【答案】自然受精和早期胚胎發(fā)育 同期發(fā)情處理 胚胎分割 無(wú)性繁殖 原料 能量 SmaⅠ HindⅢ 限制酶SmaⅠ破壞目的基因的結(jié)構(gòu)，限制酶HindⅢ必須與限制酶EcoRI或者PstI結(jié)合才能獲取目的基因，這兩種限制酶組合切割質(zhì)粒會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒的兩個(gè)標(biāo)記基因結(jié)構(gòu)被破壞，使得重組質(zhì)粒無(wú)標(biāo)記基因。

【解析】

1、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

2、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制

（2）過(guò)程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

（1）胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作；

對(duì)供、受體母牛用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境；來(lái)自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此要獲得同卵雙胎或多胎的個(gè)體，則應(yīng)采用胚胎分割技術(shù)；由于來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，屬于無(wú)性繁殖。

（2）PCR的原理是DNA的雙鏈復(fù)制。PCR過(guò)程中dNTP的作用是提供原料和能量；限制酶SmaⅠ破壞目的基因的結(jié)構(gòu)，限制酶HindⅢ必須與限制酶EcoRI或者PstI結(jié)合才能獲取目的基因，這兩種限制酶組合切割質(zhì)粒會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒的兩個(gè)標(biāo)記基因結(jié)構(gòu)被破壞，使得重組質(zhì)粒無(wú)標(biāo)記基因，所以不能選擇SmaⅠ和HindⅢ這兩種限制酶構(gòu)建基因表達(dá)載體。