Question

18．科學(xué)家利用基因工程的方法，將抗菜青蟲的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種，如圖所示．該抗蟲品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白，能大大減輕菜青蟲對油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量．

（1）Ti質(zhì)粒在基因工程中的作用是作為運輸目的基因的運載體．
（2）轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜的培育是否成功，最簡便的檢測方法是用該油菜葉飼喂害蟲．
（3）已知轉(zhuǎn)基因油菜中殺蟲蛋白能與某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，使這些昆蟲的腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞膜穿孔，導(dǎo)致細(xì)胞裂解死亡．而該殺蟲蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞表面無（相應(yīng)的）特異性受體．
（4）Bt毒蛋白基因在蘇云金芽孢桿菌和油菜細(xì)胞中均表達(dá)出相同的殺蟲蛋白，是因為生物共用一套遺傳密碼．培育轉(zhuǎn)基因油菜還需用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞的全能性．在植物組織培養(yǎng)中，要使細(xì)胞分化頻率得以提高，細(xì)胞分裂素和生長素的方法為先使用細(xì)胞分裂素，再使用生長素；愈傷組織細(xì)胞分化出不同組織器官的原因是不同細(xì)胞中基因的選擇性表達(dá)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）作為運輸目的基因進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的運輸工具因為要讓目的基因進(jìn)入細(xì)胞，必須要讓它借助工具進(jìn)去，而且需滿足目的基因可以在里面可以轉(zhuǎn)錄翻譯復(fù)制，達(dá)到目的，那么質(zhì)粒就是一個很好的運輸工具．（2）轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜的培育是否成功，最簡便的檢測方法是用該油菜葉飼喂害蟲，若害蟲死亡則說明培育成功．
（3）已知轉(zhuǎn)基因油菜中殺蟲蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡．而該殺蟲蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞表面無（相應(yīng)的）特異性受體．
（4）Bt毒蛋白基因在蘇云金芽孢桿菌和油菜細(xì)胞中均表達(dá)出相同的殺蟲蛋白，是因為生物共用一套遺傳密碼．培育轉(zhuǎn)基因油菜還需用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞的全能性．在植物組織培養(yǎng)中，要使細(xì)胞分化頻率得以提高，細(xì)胞分裂素和生長素的方法為先使用細(xì)胞分裂素，再使用生長素；愈傷組織細(xì)胞分化出不同組織器官的原因是不同細(xì)胞中基因的選擇性表達(dá)．
故答案為：
（1）作為運輸目的基因的運載體
（2）用該油菜葉飼喂害蟲
（3）無（相應(yīng)的）特異性受體
（4）生物共用一套遺傳密碼    細(xì)胞的全能性   先使用細(xì)胞分裂素，再使用生長素    基因的選擇性表達(dá)．

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．