Question

9．已知甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲危害而減產(chǎn)，乙種昆蟲食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡．因此，可將丙種蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)入到甲種農(nóng)作物體內(nèi)，使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲危害的能力．回答下列問題：
（1）為了獲得丙種蛋白質(zhì)的基因，根據(jù)丙種蛋白質(zhì)的基因序列，推測出丙種蛋白質(zhì)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對原則，推測其DNA的堿基序列；再通過化學(xué)方  法合成所需基因．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生平末端．若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生相同（相同、不同）粘性末端的限制酶．基因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（3）為了檢測丙種蛋白質(zhì)的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的丙種蛋白質(zhì)的基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術(shù)稱為DNA-RNA分子雜交．
（4）將丙種蛋白質(zhì)基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入甲種農(nóng)作物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA 中，然后用該農(nóng)桿菌感染甲種農(nóng)作物細(xì)胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞中染色體上，使目的基因的遺傳特性得意穩(wěn)定維持和表達(dá)．

Answer 1

分析 本題考生著重從目的基因的獲取和基因工程的操作工具著手解答．獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取 ②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增 ③人工合成（化學(xué)合成）；DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．

解答 解：（1）在已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列的情況下，可根據(jù)氨基酸和堿基的對應(yīng)關(guān)系，推出合成該蛋白質(zhì)的mRNA序列，依據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則再推出DNA的堿基序列，用DNA合成儀通過化學(xué)方法來合成目的基因．
（2）用限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生平口末端．若要在限制酶基因工程中，往往采用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒以產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶使其直接進(jìn)行連接．標(biāo)記基因用于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（3）為了檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用分子雜交技術(shù)，即用放射性同位素標(biāo)記的胰島素基因作探針與mRNA雜交．
（4）采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞時，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的染色體DNA上．
故答案為：
（1）基因　堿基
（2）平 相同   鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來
（3）DNA-RNA分子雜交
（4）T-DNA 染色體

點(diǎn)評 本題考查基因工程中目的基因的獲取、工具酶以及目的基因的檢測等相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解能力，難度不大．