Question

（10分）為研究水稻D基因的功能，研究者將T-DNA插入到D基因中，致使該基因失活，失活后的基因記為d。現(xiàn)以野生植株和突變植株作為親本進行雜交實驗，統(tǒng)計母本植株的結(jié)實率，結(jié)果如下表所示。

雜交編號	親本組合	結(jié)實數(shù)/授粉的小花數(shù)	結(jié)實率
①	♀DD×♂dd	16/158	10％
②	♀dd×♂DD	77/154	50％
③	♀DD×♂DD	71/141	50％

（1）表中數(shù)據(jù)表明，D基因失活使________配子育性降低。為確定配子育性降低是由于D基因失活造成的，可將________作為目的基因，與載體連接后，導(dǎo)入到________（填“野生”或“突變”）植株的幼芽經(jīng)過________形成的愈傷組織中，最后觀察轉(zhuǎn)基因水稻配子育性是否得到恢復(fù)。

（2）用________觀察并比較野生植株和突變植株的配子形成，發(fā)現(xiàn)D基因失活不影響二者的________分裂。

（3）進一步研究表明，配子育性降低是因為D基因失活直接導(dǎo)致配子本身受精能力下降。若讓雜交①的F1給雜交②的F1授粉，預(yù)期結(jié)實率為________，所獲得的F2植株的基因型及比例為________。

（4）為驗證F2植株基因型及比例，研究者根據(jù)D基因、T-DNA的序列，設(shè)計了3種引物，如下圖所示：

隨機選取F2植株若干，提取各植株的總DNA，分別用引物“Ⅰ+Ⅲ”組合及“Ⅱ+Ⅲ”組合進行PCR，檢測是否擴增（完整的T-DNA過大，不能完成PCR）。若________，則相應(yīng)植株的基因型為Dd；同理可判斷其他基因型，進而統(tǒng)計各基因型比例。

（5）研究表明D基因表達產(chǎn)物（D蛋白）含有WD40（氨基酸序列），而通常含有WD40的蛋白都定位在細胞核內(nèi)。為探究D蛋白是否為核蛋白，研究者將D基因與黃色熒光蛋白基因融合；同時將已知的核蛋白基因與藍色熒光蛋白基因融合。再將兩種融合基因?qū)�入植物原生質(zhì)體表達系統(tǒng)，如果________，則表明D蛋白是核蛋白。

Answer 1