Question

4．限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列．如圖為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的辨識(shí)序列．箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合？其正確的末端互補(bǔ)序列是什么（　�。�

• A． BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互補(bǔ)序列為-AATT-
• B． BamHⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為-GATC-
• C． EcoRⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為-AATT-
• D． BamHⅠ和BglⅡ；末端互補(bǔ)序列為-GATC-

Answer 1

分析 1．限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）是“分子手術(shù)刀”．來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的．功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性．結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．
2．解答本題的關(guān)鍵是理解限制酶的特點(diǎn)．切割目的基因和運(yùn)載體時(shí)，一定要使用同一種限制性內(nèi)切酶，這樣，切出的切口才一樣，才能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)連接起來(lái)．兩個(gè)黏性末端只要相同就可以進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，再通過(guò)DNA連接酶連接起來(lái)．

解答 解：限制酶所識(shí)別的是特定的堿基序列，并在特定部位進(jìn)行切割，不同的限制酶識(shí)別不同的核苷酸序列并識(shí)別不同的切點(diǎn)，黏性末端不同．但不同的粘性末端有時(shí)是可以進(jìn)行拼接的，只要切下的游離堿基互補(bǔ)即可互補(bǔ)黏合，由圖示可知BamHⅠ和BglⅡ都可切下序列-GATC-，故末端互補(bǔ)序列-GATC-．
故選：D．

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記限制酶的特點(diǎn)及作用，能準(zhǔn)確圖中判斷不同限制酶切割形成的黏性末端，明確只有相同或互補(bǔ)配對(duì)的黏性末端才能互補(bǔ)黏合．