Question

【題目】三孢布拉霉菌能用來(lái)生產(chǎn)胡蘿卜素，但該菌株的高產(chǎn)性狀容易退化，需要定期篩選出高產(chǎn)菌株，研究表明菌體細(xì)胞內(nèi)的[H]可將無(wú)色的TTC還原為紅色復(fù)合物，且菌體細(xì)胞內(nèi)[H]含量越高，還原能力越強(qiáng)，胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)。請(qǐng)結(jié)合下列篩選菌株及提取胡蘿卜素的流程圖回答問(wèn)題：

三孢布拉霉菌液→梯度稀釋→涂布到含有TTC的培養(yǎng)基上→挑取單菌落→擴(kuò)大培養(yǎng)→收集菌絲并處理→萃取→鑒定

（1）工業(yè)生產(chǎn)上提取天然胡蘿卜素的方法主要有三種，除可利用上述微生物的發(fā)酵生產(chǎn)之外，還可以從植物中提取和從______________中獲取。

（2）將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上，目的是篩選出______________，對(duì)照組需涂布等量的__________以判斷培養(yǎng)基是否被污染。挑取單菌落時(shí)，若菌落周圍______________，則菌株合成胡蘿卜素的能力較強(qiáng)。

（3）從該微生物中提取胡蘿卜素時(shí)，擴(kuò)大培養(yǎng)后要收集菌絲進(jìn)行的處理是粉碎和___________，以提高萃取效率。萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是防止______________。

（4）鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通常采用________________法，該方法也可用于分離色素，其原理是______________________。

Answer 1

【答案】 （從大面積養(yǎng)殖的）巖藻 合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體（高產(chǎn)菌株） 無(wú)菌水 紅色較深 干燥 有機(jī)溶劑揮發(fā) 紙層析法 不同色素在有機(jī)溶劑中的溶解度不同

【解析】試題分析：三孢布拉霉菌在含有TTC的培養(yǎng)基上，由于菌體細(xì)胞內(nèi)含義[H]，可將無(wú)色的TTC還原為紅色復(fù)合物，從而確定三孢布拉霉菌的存在，且紅色越深，說(shuō)明菌體內(nèi)產(chǎn)生[H]越多，越符合生產(chǎn)提取要求。

（1）工業(yè)生產(chǎn)上提取胡蘿卜素的方法有利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)，從植物中提取和從大面積養(yǎng)殖的巖藻中得。

（2）由題干可知，三孢布拉霉菌細(xì)胞內(nèi)的[H]可將無(wú)色的TTC還原為紅色復(fù)合物，且[H]含量越高，胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)。所以，將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上的目的是篩選出合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體，對(duì)照組需涂布等量的無(wú)菌水。挑取單菌落時(shí)，若菌落周圍紅色較深，則菌株合成胡蘿卜素的能力較強(qiáng)。

（3）收集菌絲后要進(jìn)行粉碎和干燥，除去水分，其目的是提高萃取效率；由于胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑，有機(jī)溶劑具有易揮發(fā)的特點(diǎn)，所以萃取加熱時(shí)的冷凝回流裝置是防止有機(jī)溶劑揮發(fā)。

（4）鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，類比葉綠素提取與分離實(shí)驗(yàn)，根據(jù)不同色素在有機(jī)溶劑中的溶解度不同的原理，采用紙層析法，將色素分離出來(lái)，并與標(biāo)準(zhǔn)色素帶進(jìn)行對(duì)比。