Question

6．將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如圖所示：

（1）過(guò)程①需要使用的工具酶是限制酶和DNA連接酶．構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒除了含有Bt基因外，還包括啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等．
（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)干菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)倍養(yǎng)，目的是篩選出獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞．
（3）若過(guò)程④僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)甚中增加細(xì)胞分裂素濃度以獲得芽；部分接種在無(wú)激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根，原因是芽頂端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸，促進(jìn)根的分化．
（4）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲（抗蟲接種實(shí)驗(yàn)）．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥（殺蟲劑）的使用，以減輕環(huán)境污染．

Answer 1

分析 分析圖解：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過(guò)程圖，主要包括：①基因表達(dá)載體的構(gòu)建；②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，并脫分化形成愈傷組織，④再分化，將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．

解答 解：（1）過(guò)程①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要同種限制酶對(duì)含有Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切，然后再利用DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒．構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒除了含有Bt基因外，還包括啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因等．
（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)的目的是讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞，卡那霉素作用是篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞．
（3）過(guò)程④中在培養(yǎng)基中增加細(xì)胞分裂素濃度可以獲得大量的芽；同時(shí)芽頂端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸，促進(jìn)根的分化．
（4）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，若棉鈴蟲大量死亡，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因成功．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶  復(fù)制原點(diǎn)  標(biāo)記基因
（2）T-DNA   篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞
（3）細(xì)胞分裂素濃度　   芽頂端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸，促進(jìn)根的分化
（4）投放棉鈴蟲（抗蟲接種實(shí)驗(yàn)）　   農(nóng)藥（殺蟲劑）

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．