Question

科學(xué)家通過(guò)基因工程，將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入到普通棉株細(xì)胞內(nèi)，并成功的實(shí)現(xiàn)了表達(dá)，從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株──抗蟲棉．其過(guò)程大致如圖所示：

（1）基因工程的操作程序主要包括四個(gè)步驟，其核心是

 

．
（2）獲取Bt毒蛋白基因的方法一般有

 

、

 

、

 

．
（3）Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中是利用了T-DNA的

 

特點(diǎn)．
（4）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法很多，在該題中涉及到的方法是

 

．
（5）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成必須有

 

．
（6）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是

 

．這需要通過(guò)檢測(cè)才能知道，檢測(cè)采用的方法是

 

．若從個(gè)體水平來(lái)任何檢測(cè)？

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖解可知，圖中將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因和Ti質(zhì)粒進(jìn)行重組，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞；在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成完整植株．
基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程中的核心步驟，其組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)．
目的基因的檢測(cè)與鑒定
（1）分子水平上的檢測(cè)  
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)
（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來(lái)鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答： 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
（2）目的基因的獲取方法一般有從基因文庫(kù)中獲取目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因、人工合成法．
（3）Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中是利用了T-DNA的可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA分子上特點(diǎn)．
（4）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法很多，圖中利用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中．
（5）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成必須有啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制起點(diǎn)．
（6）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入了受體細(xì)胞的染色體DNA分子上．這需要通過(guò)檢測(cè)才能知道，檢測(cè)采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)．若從個(gè)體水平可以用抗蟲的接種實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建
（2）從基因文庫(kù)中獲取目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因、人工合成法
（3）可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA分子上
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 
（5）啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制起點(diǎn)
（6）目的基因是否插入了受體細(xì)胞的染色體DNA分子上  DNA分子雜交技術(shù)  抗蟲的接種實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí)，難度適中，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的考查．要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟；識(shí)記目的基因獲取的三種方法；識(shí)記基因表達(dá)載體的組成等方面的知識(shí)；要求考生能夠構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)．