Question

【題目】【生物一選修1生物技術(shù)實(shí)踐】自然界中的微生物往往是混雜生長(zhǎng)的。人們?cè)谘芯课⑸�物時(shí)一般先要將它們分離提純，然后進(jìn)行數(shù)量的測(cè)定。下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答有關(guān)問題。步驟如下：

A．制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。

B．在適宜溫度下培養(yǎng)。

（1）為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，你選用的接種方法是__________。

（2）測(cè)定的大腸桿菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是______。其理由是 。

A．一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是53

B．兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是62和76，取平均值69

C．三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是61、35和82，取平均值59

D．四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、42、61和55，取平均值45

（3）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為43．4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0．2 mL）__________。

（4）用這種方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量________，因?yàn)?/span>____________。

（5）下表是某同學(xué)測(cè)定某土壤樣品中自生固氮菌數(shù)量時(shí)配制的培養(yǎng)基配方。

培養(yǎng)基	NaNO3	K2HPO4	KCl	MgSO4	FeSO4	蔗糖	瓊脂	蒸餾水
質(zhì)量	2 g	1 g	0．5 g	0．5 g	0．01 g	30 g	15～20 g	1000 mL

有同學(xué)認(rèn)為此培養(yǎng)基配方有誤，請(qǐng)指出： _____________________。

Answer 1

【答案】（1）稀釋涂布平板法

（2）C 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一般要涂布至少三個(gè)平板作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)

驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平

板計(jì)數(shù)。3分

（3）2．17×108

（4）多 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落

（5）培養(yǎng)基的配方中含有氮源是錯(cuò)誤的，應(yīng)將NaNO3改為不含N的鈉鹽

【解析】（1）欲實(shí)現(xiàn)微生物的計(jì)數(shù)，通常使用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行接種。

（2）測(cè)定的大腸桿菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是61、35和82，取平均值59。其理由是在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一般要涂布至少三個(gè)平板作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板計(jì)數(shù)。

（3）一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為43．4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0．2 mL）43．4×106/ 0．2＝2．17×108。

（4）用這種方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量多，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落。

（5）此培養(yǎng)基的配方中含有氮源是錯(cuò)誤的，應(yīng)將NaNO3改為不含N的鈉鹽。