Question

15．利用動物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為動物乳腺反應(yīng)器技術(shù)．青島“嶗山奶山羊乳腺反應(yīng)器研制”項目通過鑒定，該項目產(chǎn)生的藥用蛋白具有表達(dá)效率高、成本低、安全性高、易于分離純化的優(yōu)點，可產(chǎn)生干擾素、乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等醫(yī)藥產(chǎn)品，造福人類．
請根據(jù)這一科技成果的研究過程回答問題：
（1）研究人員用DNA測序儀顯示了基因組的某DNA片段一條鏈的堿基排列順序圖片．其中圖1的堿基排列順序已經(jīng)解讀，其順序是：GGTTATGCGT，請解讀圖2顯示的堿基排列順序：GATGCGTTCG．
（2）科學(xué)家從相關(guān)基因組中獲取了目的基因，并采用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體組合形成了重組載體．在重組載體的構(gòu)建過程中需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶．
（3）在基因工程操作過程中，基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，一個基因表達(dá)載體的組成必須有標(biāo)記基因，其作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（4）如何檢測和鑒定目的基因已被成功導(dǎo)入羊體內(nèi)？請寫出兩種方法DNA分子雜交、DNA與mRNA分子雜交．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）圖1的堿基排列順序是：GGTTATGCGT，由此可知圖中堿基序列應(yīng)從下向上解讀，根據(jù)已知的堿基序列可知從左向右四種堿基依次是ACGT，所以圖2中堿基序列是GATGCGTTCG．
（2）可采用PCR技術(shù)體外擴增目的基因（干擾素基因）；構(gòu)建基因表達(dá)載體時，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子，其次還需要用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組DNA分子．
（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心內(nèi)容．一個基因表達(dá)載體的組成，主要有目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
（4）檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)，②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）GATGCGTTCG
（2）PCR    限制酶、DNA連接酶
（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建      為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來    
（4）DNA分子雜交   DNA與mRNA分子雜交

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)及基因工程的應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．