Question

【題目】當將一段人類DNA胰島素基因片段接合到細菌的DNA中時，細菌就會開始產生人的胰島素。

（1）此工程屬于_____________（動物/植物/微生物）基因工程。

（2）上述基因工程中，導入細菌的重組DNA分子的組成應該是_____________。

A.人類胰島素基因+細菌基因

B.人類胰島素基因+細菌基因+運載體

C.人類胰島素基因+DNA連接酶

D.人類胰島素基因+運載體

為了解基因結構，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術將單酶水解片段分離，計算相對大��；然后再用另一種酶對單酶水解片段進一步降解， 分析片段大小。下列是某小組進行的相關實驗。

已知一線性DNA序列共有5 000bp （bp為堿基對）	第一步水解	產物（單位：bp）	第二步水解	產物（單位:bp）
	E酶切割	2100	第一步水解產物分離后，分別用F酶切割	1900 200
		1400		800 600
		1000		1000
		500		500
	F酶切割	2500	將第一步水解產物分離后分別用E酶切割	1900 600
		1300		800 500
		1200		1000 200
	經E酶和F 酶同時切割	1900 1000 800 600 500 200

（3）該實驗設計主要體現(xiàn)了_____________原則。

（4）根據(jù)表中數(shù)據(jù)，下圖中標出了相應限制性酶的酶切位點，正確的是_____________。

A.

B.

C.

D.

（5）據(jù)左圖、右圖可知，為高效利用F酶的酶切作用，反應溫度最好控制在____________。

A. 50°C B. 60°C

C. 70°C D. 80°C

你的判斷理由是________________________________________________。

Answer 1

【答案】微生物 D 對照（單一變量） C B 由左圖可知，當溫度為60°C70°C時，酶活性較高，而由右圖可知70°C時保溫30分鐘，酶活性開始減弱，而60°C保溫30分鐘后 酶活性基本不發(fā)生變化，由此可知為高效利用F酶，反應溫度最好應控制在60°C

【解析】

限制性核酸內切酶是可以識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶，簡稱限制酶。由表格分析可知E酶切割后有4段產物，說明酶E有3個切割位點；F酶切割后有3段產物，說明酶F有2個切割位點。

（1）該基因工程的受體細胞是細菌，故此工程屬于微生物基因工程。

（2）上述基因工程中，目的基因是人類胰島素基因，需要用運載體導入細菌，故導入細菌的重組DNA分子的組成應該是人類胰島素基因+運載體，故選D。

（3）設計實驗的基本原則要有對照實驗。

（4）E酶切割后有4段產物，說明酶E有3個切割位點；F酶切割后有3段產物，說明酶F有2個切割位點。由表中酶切割后片段長度可知，1900+600=2500，800+500=1300，1000+200=1200，所以連接如C圖所示，故選C。

（5）由左圖可知，當溫度為60°C70°C時，酶活性較高，而由右圖可知70°C時保溫30分鐘，酶活性開始減弱，而60°C保溫30分鐘后 酶活性基本不發(fā)生變化，由此可知為高效利用F酶，反應溫度最好應控制在60°C，故選B。