Question

12．煙草是種植廣泛的經(jīng)濟作物，由于相關病毒的感染會導致大量減產(chǎn)．煙草花葉病毒（TMV）主要由蛋白質(zhì)外殼和RNA組成，這種病毒感染煙草時能引起花葉病，在煙葉上出現(xiàn)病斑．
研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖所示．請分析并回答：

圖中過程①表示反轉(zhuǎn)錄，經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)除應含有相關限制酶的酶切位點外，目的基因的兩端還必須有啟動子和終止子．由圖分析，構建的重組質(zhì)粒上含有的標記基因是卡那霉素抗性基因．過程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)技術，培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素，以保證受體細胞能經(jīng)培養(yǎng)再生成植株．過程⑥可采取抗原-抗體雜交的方法，檢測植株是否合成了相關蛋白．在個體水平的鑒定過程中，可通過接種煙草花葉病毒的方法來確定植株是否具有抗性．

Answer 1

分析 本題是對通過基因工程獲得抗煙草花葉病毒植株的考查，回憶教材中分析通過基因工程培育抗TMV的煙草的流程．
分析題圖：圖中①是由RNA形成DNA的過程，是逆轉(zhuǎn)錄過程，目的基因獲得后需要用限制性內(nèi)切酶切割，獲得粘性末端，基因要表達還必須有啟動子和終止子，因此經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)應含有限制酶的切割位點、啟動子和終止子；過程③構建了重組質(zhì)粒；過程④將重組質(zhì)粒導入受體細胞；過程⑤受體細胞放在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，過程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素；過程⑥獲得轉(zhuǎn)基因植物要進行檢測，分子水平上檢測植株是否合成了相關蛋白，可以用抗原-抗體雜交的方法進行檢測；個體水平上可以用煙草花葉病毒感染該植株，看該植株對煙草花葉病毒是否具有抗性．梳理基因工程的過程解答．

解答 解：分析題圖可知，本題是通過基因工程培育抗TMV的煙草的流程，圖中①是由RNA形成DNA的過程，是逆轉(zhuǎn)錄過程；目的基因獲得后需要用限制性內(nèi)切酶切割，獲得粘性末端；基因要表達還必須有啟動子和終止子，因此經(jīng)過程②獲得的目的基因兩側(cè)應含有限制酶的切割位點、啟動子和終止子；由圖分析，受體細胞放在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，說明構建的重組質(zhì)粒上含有的標記基因是卡那霉素抗性基因；過程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素；分子水平上檢測植株是否合成了相關蛋白，可以用抗原-抗體雜交的方法進行檢測；個體水平上可以用煙草花葉病毒感染該植株，看該植株對煙草花葉病毒是否具有抗性．
故答案應為：
反轉(zhuǎn)錄    限制酶   啟動子和終止子  卡那霉素抗性
植物組織培養(yǎng)         植物激素
抗原-抗體雜交     接種煙草花葉病毒

點評 本題的知識點是基因工程的過程，對于相關知識的記憶是解題的關鍵．