Question

11．油煙污染由多種有害物質(zhì)組成，不易降解．某同學從長期受到金龍魚油產(chǎn)生的油煙污染的土壤中分離出油煙降解菌，其篩選分離過程如圖所示，回答下列問題：

（1）圖中①③的過程稱為選擇培養(yǎng)，其目的是初步篩選出能分解油煙的微生物，并增大其濃度．
（2）該同學將 ③中的微生物培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)基④之前，進行了梯度稀釋，制成稀釋倍數(shù)分別為10^-1、10^-2、10^-3的不同稀釋度的樣品液，在三個梯度稀釋倍數(shù)下，分別吸取0.1mL樣品液涂布于培養(yǎng)基上，每個稀釋倍數(shù)涂布三個培養(yǎng)基，最終形成的菌落的數(shù)目如表所示：

稀釋倍數(shù)培養(yǎng)基編號	甲	乙	丙
10-1	168	172	170
10-2	12	14	19
10-3	2	3	6

應選擇稀釋倍數(shù)為10^-1的培養(yǎng)基進行計數(shù)，稀釋前每毫升菌液中含有油煙降解菌的數(shù)目為1.7×10⁴，這種計數(shù)方法統(tǒng)計的數(shù)據(jù)結(jié)果往往會比顯微鏡直接計數(shù)的結(jié)果小，其原因是該方法只是統(tǒng)計活菌數(shù)量，并且當多個細菌相互靠近時，會形成一個菌落，造成計數(shù)結(jié)果偏�。�
（3）在⑤中的固體培養(yǎng)基應加入金龍魚油，其作用是為微生物提供碳源和能源．培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法．若要判斷固體培養(yǎng)基是否起到了選擇的作用，應如何設計實驗再設置一個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，在對照培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上接種等量的菌液后比較兩培養(yǎng)基中菌落的數(shù)目．

Answer 1

分析 1、結(jié)合題干分析題圖：圖中以“金龍魚油”作為唯一碳源的培養(yǎng)基來培養(yǎng)土壤樣品，能夠分離出能夠分解油煙的微生物．
2、選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率．
3、檢測土壤中細菌總數(shù)，可以看出采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法進行計數(shù)．用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數(shù)．

解答 解：（1）分析圖解可知，圖中①③的培養(yǎng)過程中加入金龍魚油作為唯一碳源，能夠初步篩選出能分解油煙的微生物，并增大其濃度，因此稱為選擇培養(yǎng)．
（2）利用稀釋涂布平板法對微生物進行計數(shù)時選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可知，應選擇稀釋倍數(shù)為10^-1的培養(yǎng)基進行計數(shù)，稀釋前每毫升菌液中含有油煙降解菌的數(shù)目=（168+172+170）÷3÷0.1×10^-1=1.7×10⁴．該方法只是統(tǒng)計活菌數(shù)量，并且當多個細菌相互靠近時，會形成一個菌落，因此這種計數(shù)方法統(tǒng)計的數(shù)據(jù)結(jié)果往往會比顯微鏡直接計數(shù)的結(jié)果�。�
（3）在⑤中的固體培養(yǎng)基應加入金龍魚油，其作用是為微生物提供碳源和能源．培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法．若要判斷固體培養(yǎng)基是否起到了選擇的作用，應再設置一個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，在對照培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上接種等量的菌液后比較兩培養(yǎng)基中菌落的數(shù)目．
故答案為：
（1）選擇培養(yǎng)      初步篩選出能分解油煙的微生物，并增大其濃度
（2）10^-1   1.7×10⁴     該方法只是統(tǒng)計活菌數(shù)量，并且當多個細菌相互靠近時，會形成一個菌落，造成計數(shù)結(jié)果偏小
（3）為微生物提供碳源和能源    高壓蒸汽滅菌法   再設置一個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，在對照培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上接種等量的菌液后比較兩培養(yǎng)基中菌落的數(shù)目

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識啊，要求考生掌握選擇培養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng)的原理和方法，掌握測定某種微生物數(shù)量的方法，同時具有一定的實驗設計能力，掌握對照實驗的設計原則．