圖1為某種質(zhì)粒簡圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI、BamHI、Hind Ⅲ的酶切位點。下列有關(guān)敘述錯誤的是 

A.如果用EcoRI對外源DNA和質(zhì)粒進行酶切，將多個含有目的基因的DNA片段與多個質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，兩兩連接所形成的產(chǎn)物有三種

B.如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRI酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRI酶切點有1個

C.為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時應(yīng)使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理

D.如果要將重組DNA導入大腸桿菌細胞，則用氯化鈣處理大腸桿菌可以增加其細胞壁的通透性，利于重組DNA的導入

 

【答案】

B

【解析】

試題分析：如果用EcoRI對外源DNA和質(zhì)粒進行酶切，因為粘性末端相同，將多個含有目的基因的DNA片段與多個質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，兩兩連接所形成的產(chǎn)物有空質(zhì)粒，反向連接的質(zhì)粒，正向連接的質(zhì)粒三種，故A正確。如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoRI酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRI酶切點有2個，故B錯誤。為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時應(yīng)使用雙酶切最好，故C正確。用鈣離子處理細菌細胞增強其通透性，可以提高轉(zhuǎn)化效率，故D正確。

考點：本題考查基因工程相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度。

 

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：

下圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tetR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、?BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。?

據(jù)圖回答：?

（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI?酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有                    、                  、              三種。若 要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行                。?

（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是            ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是            。?

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是            ，其合成的產(chǎn)物是            。?

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是           。?

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科目：高中生物 來源： 題型：

圖為某種質(zhì)粒表到載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR 為四環(huán)素抗性基因，P啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。

據(jù)圖回答：

（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒該表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用ＤＮＡ連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有       、         、   

      三種 。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行        。

（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是         ；

（3）在上述實驗中，為了防止目的基因和基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是                。

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科目：高中生物 來源： 題型：

（08海南卷）

圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動因子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。

（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有          、          、         三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行                  。

（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞接種到含四環(huán)的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是                  ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是               。

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是              ，其合成的產(chǎn)物是         。

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶時                     。

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科目：高中生物 來源：2012屆遼寧省高二6月月考生物試卷 題型：綜合題

圖為某種質(zhì)粒表答載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR 為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。據(jù)圖回答：

 

(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒該表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用ＤＮＡ連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有       、         、          三種 。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出         ，需要對這些連接產(chǎn)物進行分離純化。

(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是         ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是           。

(3)目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是       ，其合成的產(chǎn)物是        。

 (4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是                。

來

 

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