Question

7．運用所學知識回答下列問題：
將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如如圖所示（注：農桿菌中Ti質粒上只有T-DNA片段能轉移到植物細胞中）．

（1）過程①需用同種限制性核酸內切酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切．為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來，應使用選擇培養(yǎng)基．
（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓T-DNA進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是篩選獲得T-DNA片段的植物細胞．
（3）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲．種植轉基因抗蟲棉能減
少農藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）已知IgG抗體能消除狂犬病病毒．特異性IgG抗體獲取也可用單克隆抗體制備法，下面是單克隆抗體的制備過程示意圖，請回答下列問題．

①從小鼠的脾臟中取得B淋巴細胞之前，給小鼠注射的物質A是狂犬病病毒（抗原）．
②動物細胞融合除了采用植物原生質體融合常用的誘導方法外，還可以采用滅活的病毒．
③B過程的目的是篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞．
④單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強，靈敏度高，可大量制備．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉基因抗蟲棉的培育過程圖，主要包括：①基因表達載體的構建；②將目的基因導入農桿菌中（采用農桿菌轉化法）；③表示通過農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞，并誘導受體細胞脫分化形成愈傷組織；④⑤再分化，將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術．

解答 解：（1）過程①表示基因表達載體的構建，為了獲得相同的黏性末端，需用同種限制性核酸內切酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切．為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來，應使用選擇培養(yǎng)基．
（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓T-DNA進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，篩選獲得T-DNA片段的植物細胞．
（3）檢驗轉基因棉的抗蟲性狀，常用個體水平進行鑒定，即投放棉鈴蟲．種植轉基因抗蟲棉能減
少農藥的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）①制備單克隆抗體需要獲得已免疫的B淋巴細胞，因此需要給小鼠注射狂犬病病毒（抗原）．
②植物原生質體融合的方法包括物理法和化學法，動物細胞融合除了這兩種誘導方法外，還可以采用滅活的病毒．
③B過程的目的是篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞．
④單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強，靈敏度高，可大量制備．
故答案為：
（1）限制性核酸內切酶   選擇      
（2）T-DNA       篩選獲得T-DNA片段的植物細胞
（3）投放棉鈴蟲    農藥
（4）①狂犬病病毒（抗原）   ②滅活的病毒   ③篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞
④特異性強，靈敏度高，可大量制備

點評 本題考查基因工程、單克隆抗體制備的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，識記單克隆抗體制備的過程和優(yōu)點等，能結合所學的知識準確答題．