Question

4．飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解稱為可以吸收利用的磷酸鹽等．如圖是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖．請分析作答．

（1）分離產(chǎn)植酸酶的菌株，需先配制合適的培養(yǎng)基．配制培養(yǎng)基時，在各成分都融化后和分裝前，要進行的是調(diào)整pH和滅菌．對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌法．
（2）接種以前進進行的一系列稀釋操作，目的是在固體培養(yǎng)基表面形成單個菌落．這種接種方法是稀釋涂布平板法．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)．如果一培養(yǎng)基上有3個菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量是3×10⁶個．
（3）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．實驗結(jié)果顯示A～E五種菌株中，E是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株．
（4）植酸酶的活力可用單位時間單位體積內(nèi)底物消耗（產(chǎn)物產(chǎn)生）的量來表示．

Answer 1

分析 1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板．
2、稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上分離、培養(yǎng)出微生物的單個菌落，以便于計數(shù)、移植、分離，從而達到純培養(yǎng)的目的．
3、由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．

解答 解：（1）配制培養(yǎng)基時，在各成分都融化后和分裝前，要進行的是調(diào)pH和滅菌．對培養(yǎng)基滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌．
（2）接種以前進行的一系列稀釋操作，表明該接種方式為稀釋涂布平板法，目的是在培養(yǎng)皿表面形成單個菌落．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)．如果按題中處理后，統(tǒng)計的平板上平均有3個菌落，則1g土壤中大致的活菌數(shù)量=3÷0.1×10⁵═3×10⁶．
（3）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)生植酸酶．分析題圖可知，菌落E周圍的透明圈最大，是產(chǎn)植酸酶的理想菌株．
（4）植酸酶的活力可用單位時間單位體積內(nèi)底物消耗（產(chǎn)物產(chǎn)生）的量來表示．
故答案為：
（1）調(diào)整pH   高壓蒸汽滅菌法
（2）單個菌落 　 稀釋涂布平板法   菌落數(shù)   3×10⁶
（3）E
（4）單位時間單位體積內(nèi)底物消耗（產(chǎn)物產(chǎn)生）

點評 本題的知識點是培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分，實驗過程中的無菌技術(shù)，統(tǒng)計樣品中菌落數(shù)的方法，主要考查學生對微生物培養(yǎng)知識的掌握和利用微生物培養(yǎng)技術(shù)解決生產(chǎn)、生活中問題的能力．