Question

14．轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示．質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)．請(qǐng)回答：

（1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用PstI、EcoRI限制酶，對(duì)質(zhì)粒和含抗病基因的DNA進(jìn)行切割．
（2）培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因
（3）香蕉組織細(xì)胞具有全能性，因此，可以利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株．圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的脫分化和再分化．
（4）若要鑒定抗病基因基因是否插入香蕉愈傷組織細(xì)胞，可采用的檢測(cè)方法是DNA分子雜交技術(shù)；若要鑒定抗病基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可采用抗原抗體雜交技術(shù)檢測(cè)．

Answer 1

分析 分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，其中SmaⅠ酶的切割位點(diǎn)位于抗病基因（目的基因）上；質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點(diǎn)．所以要活動(dòng)重組質(zhì)粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進(jìn)行切割．①表示脫分化過程、②表示再分化過程、④是新植體．

解答 解：（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于抗病基因上，對(duì)SmaⅠ位點(diǎn)進(jìn)行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割．要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，應(yīng)選用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割質(zhì)粒．
（2）欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時(shí)含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因．
（3）利根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性的原理，利用組織培養(yǎng)技術(shù)能將香蕉組織細(xì)胞培育成植株．圖中①表示脫分化過程、②表示再分化過程．
（4）鑒定抗病基因基因是否插入香蕉愈傷組織細(xì)胞可采用DNA分子雜交技術(shù)；鑒定抗病基因是否翻譯成蛋白質(zhì)可采用抗原抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）PstI、EcoRI    質(zhì)粒和含抗病基因的DNA 
（2）抗卡那霉素基因
（3）全能性    植物組織培養(yǎng)  脫分化      再分化
（4）DNA分子雜交技術(shù)   抗原抗體雜交技術(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論．