Question

【題目】重組人纖溶酶原激活劑（rhPA)是臨床血栓疾病治療的主要生物藥品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多發(fā)情，產(chǎn)仔率高等優(yōu)點(diǎn)，可以作為乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)藥物。下圖是利用轉(zhuǎn)基因兔生產(chǎn)重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)的過程，請據(jù)圖回答。

（1）構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體需要用限制酶_________切割質(zhì)粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達(dá)載體需用_____________酶切割重組質(zhì)粒使之線性化。

（2）對母兔注射_________使其超速排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)人家兔受精卵中最有效的導(dǎo)入技術(shù)是____________。

（3）將受精卵置于37℃的_______________氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經(jīng)___________處理。

（4）子代兔需要經(jīng)過篩選過程才能獲得生產(chǎn)人組織纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器，原因有____________、____________。

Answer 1

【答案】 XhoⅠ SalⅠ和NotⅠ 促性腺激素 顯微注射技術(shù) 95%空氣和5%C02 同期發(fā)情（孕激素） 只有部分子代兔導(dǎo)入了人組織纖溶酶原激活劑基因 公兔不能表達(dá)人組織纖溶酶原激活劑

【解析】試題分析：熟記并理解基因工程的基本操作程序及其應(yīng)用、胚胎移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題圖和題意中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問題的解答。

(1)分析圖示可知：構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因（rhPA基因）插入到了質(zhì)粒上的XhoⅠ酶切位點(diǎn)的下方，說明是用限制酶XhoⅠ切割的質(zhì)粒和目的基因的。依據(jù)乳腺特異性表達(dá)載體的組成可知：為獲得乳腺特異性表達(dá)載體，使重組質(zhì)粒線性化，需用SalⅠ和NotⅠ酶進(jìn)行切割。

(2)對母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)入家兔受精卵中，常采用的最有效的導(dǎo)入技術(shù)是顯微注射技術(shù)。

(3) 將受精卵置于37℃的95%空氣和5%C02氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后，移植到經(jīng)同期發(fā)情（孕激素）處理的代孕兔的輸卵管中，以使該受精卵繼續(xù)發(fā)育為子代。

(4)由于只有部分子代兔導(dǎo)入了人組織纖溶酶原激活劑基因，而且公兔不能表達(dá)人組織纖溶酶原激活劑，所以子代兔需要經(jīng)過篩選過程才能獲得生產(chǎn)人組織纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器。