Question

【題目】硒是一種化學(xué)元素，可用作光敏材料、電解錳行業(yè)催化劑動物體必需的營養(yǎng)元素和植物有益的營養(yǎng)元素等。硒在地殼中的含量很低，通常極難形成工業(yè)富集。亞硒酸鈉對細(xì)菌的生長有明顯的毒害作用，土壤中的一些富硒細(xì)菌可將其還原為紅色單質(zhì)硒，除工業(yè)上生產(chǎn)硒的方法之外，利用這種方法也可以得到少量的硒及分解亞硒酸鈉的細(xì)菌。如圖為土壤中富硒細(xì)菌的篩選和純化過程。請回答下列問題。

（1）應(yīng)選擇____________的土壤樣品接種到含亞硒酸鈉的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，若②中出現(xiàn)____________的現(xiàn)象，則說明培養(yǎng)基中的亞硒酸鈉被細(xì)菌還原。

（2）④采用的接種方法為____________法，使用該方法能得到單一菌落的原理是___________。

（3）固定化富硒菌一般采用____________法，不采用另外兩種方法的原因是____________。

（4）研究人員篩選出一種具有較強(qiáng)富硒能力的菌株，現(xiàn)欲通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值，請將下列實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充完整；

①配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉____________（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基；

②向培養(yǎng)基中分別接種____________的該菌株菌液，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間；

③觀察菌落生長情況，____________的培養(yǎng)基對應(yīng)的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株的最高耐受值。

Answer 1

【答案】富含亞硒酸鈉 培養(yǎng)基變紅（紅色） 稀釋涂布平板 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 包埋 細(xì)菌細(xì)胞分子較大，難以吸附和結(jié)合，通常采用包埋法 固體 等量 有菌落生長（有菌落生長且數(shù)目最少）

【解析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）應(yīng)選擇富含亞硒酸鈉的土壤樣品接種到含亞硒酸鈉的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。由“富硒細(xì)菌可將其還原為紅色單質(zhì)硒”可知，若②中出現(xiàn)培養(yǎng)基變紅的現(xiàn)象，則說明培養(yǎng)基中的亞硒酸鈉被細(xì)菌還原。

（2）由圖可知，④采用的接種方法為稀釋涂布平板法，使用該方法能得到單一菌落的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。

（3）固定化方法包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法，固定化富硒菌一般采用包埋法，不采用另外兩種方法的原因是細(xì)菌細(xì)胞分子較大，難以吸附和結(jié)合，通常采用包埋法。

（4）①通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值，配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉固體培養(yǎng)基；

②實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)注意等量原則，故向培養(yǎng)基中分別接種等量的該菌株菌液，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間；

③亞硒酸鈉對細(xì)菌的生長有明顯的毒害作用，由題意可知，有菌落生長且數(shù)目最少的培養(yǎng)基對應(yīng)的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株的最高耐受值。