Question

8．國家飲用水標準規(guī)定，每升飲用水中大腸桿菌不超過3個．某小組欲通過實驗來檢測自來水中大腸桿菌的含量，已知大腸桿菌在伊紅-美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)，大腸桿菌菌落呈深紫色．請根據(jù)下列有關(guān)實驗步驟回答問題：

（1）配制培養(yǎng)基：配制伊紅-美藍培養(yǎng)基時，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍等原料外，還需要水、無機鹽和瓊脂．在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是蛋白胨．攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)PH，分裝到錐形瓶．
（2）倒平板：配制好的培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌 法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板．平板冷凝后應將平板倒過來（倒置） 放置，以防止皿蓋上的水珠落人培養(yǎng)基．
（3）接種：在下圖的系列稀釋操作中（10¹、10²、10³表示稀釋倍數(shù)），依次將1mL液體移人下一個盛有9 mL蒸餾水的試管中．過程a所用的接種方法為（稀釋）涂布平板法．
（4）觀察與計數(shù)：通過一段時間的培養(yǎng)，觀察統(tǒng)計培養(yǎng)皿表面深紫色菌落的數(shù)目，結(jié)果如圖所示，則自來水樣本中大腸桿菌超標1000 萬倍．
（5）用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量可能多，原因是當兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上觀察的是一個菌落．

Answer 1

分析 培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的基本營養(yǎng)成分有碳源、氮源、無機鹽、水等成分；滅菌和消毒的主要區(qū)別是：消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法反殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）；滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，故要加入凝固劑瓊脂，培養(yǎng)基的基本營養(yǎng)成分有碳源、氮源、無機鹽、水等成分，能為大腸桿菌提供氮源的是蛋白胨，溶解后還要調(diào)節(jié)PH值，再分裝到錐形瓶中．
（2）配制好的培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板．等待平板冷卻凝固（大約需5～10min）后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，防止水蒸氣凝結(jié)的小水滴污染培養(yǎng)基．
（3）系列稀釋操作中，依次將1mL液體移人下一個盛有9mL蒸餾水的試管中，使?jié)舛日�好為原來的十分之一�?br />微生物接種方法主要有（稀釋）涂布（抹）平板法和平板劃線法，過程a所用的接種方法為（稀釋）涂布平板法．
（4）根據(jù)題圖估算自來水中大腸桿菌的菌落數(shù)是3÷0.1×10³×10³=3×10⁷個/L，超標1000萬倍．
（5）由于當兩個或多個細胞連在一起時平板上觀察的是一個菌落，因此估算的菌落數(shù)少于實際菌落數(shù)．
故答案為：
（1）瓊脂    蛋白胨     PH    
（2）高壓蒸汽滅菌    倒過來（倒置）
（3）9   （稀釋）涂布平板法     
（4）1000
（5）多     當兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上觀察的是一個菌落

點評 本題考查了微生物的培養(yǎng)和數(shù)量測定的相關(guān)內(nèi)容，意在考查學生的應用和實驗探究能力，試題難度一般．